Thèse soutenue

Régulation épigénétique et transcriptionnelle de KCNN1 et KCNA2 par la protéine de fusion EWS-FLI1 : rôle dans le contrôle de la prolifération des cellules de sarcome d 'Ewing
FR  |  
EN
Accès à la thèse
Auteur / Autrice : Maryne Dupuy
Direction : Franck VerrecchiaFrançoise Redini
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie Cellulaire
Date : Soutenance le 06/07/2023
Etablissement(s) : Nantes Université
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Biologie-Santé (Nantes)
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre de Recherche en Cancérologie et Immunologie Intégrée Nantes Angers - Chromatin and Transcriptional Deregulation in Pediatric Bone Sarcoma - CHILD
Jury : Président / Présidente : Olivier Delattre
Examinateurs / Examinatrices : Christophe Vandier
Rapporteurs / Rapporteuses : Valérie Coronas, Olivia Fromigué

Mots clés

FR  |  
EN

Mots clés contrôlés

Résumé

FR  |  
EN

Le sarcome d'Ewing (SE) est la deuxième tumeur osseuse pédiatrique primitive maligne la plus fréquente. Le taux de survie des patients est d'environ 70 %, mais chute à 30 % pour les patients à hautrisque. Le traitement actuel consiste en une polychimiothérapie, suivie d'une résection chirurgicale de la tumeur. Le SE se caractérise par une translocation chromosomique qui conduit, dans 85% des cas, à la formation de la protéine de fusion EWSFLI 1, et dans 1 O % des cas, par la protéine de fusion EWS-ERG, agissant toutes deux comme des oncogènes. Afin d'améliorer les traitements actuels et d'augmenter le taux de survie, notre objectif est de mieux comprendre la biologie du SE, en étudiant le rôle des canaux ioniques dans cette tumeur. En effet, des études ont émergé sur une expression anormale des canaux potassiques dans les cellules cancéreuses, où leurs fonctions ont été détournées pour favoriser le développement de la tumeur. Parmi ces canaux, sont retrouvés les canaux potassiques activés par le calcium et les canaux potassiques dépendants du voltage. Des analyses RNA-seq de 117 biopsies de patients et de 6 lignées de cellules de SE ont montré une forte expression de KCNN1, le gène codant pour SK1, et de KCNA2, le gène codant pour Kv1 .2. I" Nantes U Université L'objectif de ce projet de doctorat était d'étudier l'implication de ces canaux dans le développement des cellules de SE. Nous avons pu prouver que KCNN1 n'est fortement exprimé que dans les tissus et les lignées cellulaires de SE, les tissus sains exprimant à peine KCNN1, alors que KCNA2 est également fortement exprimé dans le gliome. Ensuite, l'analyse de données Ch IP-Seq a démontré la régulation de ces deux gènes par EWS-FLl1 et EWS-ERG, qui se lient aux microsatellites GGAA près de leurs promoteurs. De plus, en inhibant l'expression de KCNN1 ou KCNA2, nous avons montré l'implication de SK1 et Kv1 .2 dans la régulation de la prolifération des cellules de SE. Des expériences supplémentaires ont indiqué une dépolarisation de la membrane plasmique liée à l'inhibition de KCNN1, et une réduction significative des influx calciques dans les cellules n'exprimant pas KCNN1. En ce qui concerne KCNA2, il semble que son expression régule la voie Hippo, l'expression de YAP étant diminuée après l'inhibition de KCNA2. Dans l'ensemble, ces résultats soulignent que KCNN1 et KCNA2 sont des cibles directes de EWS-FLl1 et EWSERG, et qu'ils sont impliqués dans la régulation de la prolifération des cellules de SE, ce qui en fait des cibles thérapeutiques intéressantes dans le SE.