Régulation de la maturation en 3' des pré-ARNm de gènes de susceptibilité aux cancers p53 et msh6

Pre-mRNA 3'end processing of cancer susceptibility genes p53 and msh6

• Auteur / Autrice : Adrien Decorsière
• Direction : Stéphan Vagner, Stefania Millevoi
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie moléculaire
• Date : Soutenance en 2011
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

ARN interférence

ADN -- Altération

Syndrome de Lynch

ARN messagers

Épissage (génétique)

Mots clés libres

Maturation en 3' des pré-ARNm

G-quadruplexe

P53

Msh6

Résumé

La maturation en 3' des pré-ARNm constitue une étape de régulation posttranscriptionnelle indispensable à l'expression d'un gène. Elle est composée de deux réactions : le clivage de l'extrémité 3' qui permet de libérer l'ARNm du site de transcription et l'ajout de la queue poly(A) qui contrôle à la fois l'export nucléaire, la stabilité et la traduction du transcrit mature. Plusieurs études montrent, d'une part, que la maturation en 3' est inhibée de manière globale lors de dommages à l'ADN et d'autre part, que des dérégulations de cette maturation peuvent contribuer au développement tumoral. Nos travaux se sont axés sur l'étude de la régulation de la maturation en 3' (i) du pré-ARNm de p53 lors de dommages à l'ADN (ii) du pré-ARNm de MSH6 impliqué dans le syndrome de Lynch. (i) Nos travaux ont mis en évidence que le pré-ARNm de p53 résiste à l'inhibition de la maturation en 3' due aux dommages à l'ADN, grâce au recrutement des protéines hnRNP H/F sur une structure appelée G-quadruplexe située en aval du site de clivage. (ii) Nous avons ensuite identifié une duplication des 20 nucléotides précédant le signal de polyadénylation du pré-ARNm de MSH6 dans deux familles distinctes atteintes du syndrome de Lynch. Cette duplication entraîne une diminution de l'efficacité de la maturation en 3' du pré-ARNm de MSH6 qui semble être à l'origine de la pathologie.

Pre-mRNA3'-end processing is an essential post-transcriptional step. It is composed of two reactions: cleavage at the pre-mRNA 3' end that allows release of mRNA from the transcription site and addition of the poly(A) tail that controls nuclear export, stability and the translation of the mature transcript. Several studies show that 3'end processing is globally inhibited during DNA damage and that deregulation of this process may contribute to tumor development. Our work focused on 3'-end processing regulation of (i) p53 pre-mRNA during DNA damage (ii) MSH6 pre-mRNA involved in Lynch syndrome. (i) We have shown that p53 pre-mRNA resists to DNA damagedependent inhibition of 3'-end processing through the recruitment of the protein factor hnRNP H/F on a RNA structure called G-quadruplex located downstream of the cleavage site. (ii) We then identified a duplication of 20 nucleotides upstream of the polyadenylation signal at the MSH6 pre-mRNA in two distinct families with Lynch syndrome. This duplication causes a reduction of MSH6 pre-mRNA 3'-end processing efficiency and in consequence, it may be causal of Lynch syndrome.