Couplage de l’électrophorèse capillaire avec la spectrométrie de masse via une interface à électronébulisation : compréhension des phénomènes à l’interface et développement de nouvelles méthodologies pour des échantillons complexes et pour les séparations par focalisation isoélectrique

Coupling of capillary electrophoresis with mass spectrometris via an electrospray ionization interface : new insight into the phenomena at the interface and development of new methodologies for complexe samples and for isoelectric facalisation separation

• Auteur / Autrice : Meriem Mokaddem
• Direction : Anne Varenne
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie analytique
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés libres

Electrophorèse capillaire (CE)

Spectrométrie de masse (MS)

Effets de succion

Effets de dilution

Focalisation isoélectrique couplée à l’ESI-MS

Séparation de polyanions et de cations

Résumé

Au cours de ce travail nous avons étudié les phénomènes de succion et de dilution pouvant avoir lieu à l’interface d’électronébulisation dans un couplage en l’électrophorèse capillaire et la spectrométrie de masse (CE/ESI-MS). Il a été montré l’influence de différents paramètres, dont les débits de mélangeage des trois fluides émergeant de l’aiguille d’interface et la géométrie de l’interface, qui modifient le cône de Taylor. Dans le cadre de l’analyse de mélanges complexes, une stratégie de séparation simultanée de composés cationiques et polyanioniques par couplage CZE/ESI-MS a ensuite été mise en œuvre. Enfin un nouveau protocole de couplage CIEF/ESI-MS a été développé, présentant des avantages nouveau : (i) une automatisation simple et totale du couplage, (ii) l’analyse de protéines hydrophiles et hydrophobes et (iii) l’emploi de capillaires peu coûteux

During this work we have studied suction and dilution phenomena which may occur at the electrospray interface between capillary electrophoresis and mass spectrometry coupling (CE/ESI-MS). The influence of various parameters was emphasized, among which the flow rate of the three mixing fluids emerging from interface and the geometry of the interface, which modifies the Taylor cone. As far as complex mixtures are concerned, a strategy of simultaneous separation of cationic and polyanionic compounds by CZE/ESI-MS was elaborated. Finally, a new protocol of coupling CIEF/ESI-MS was developed, presenting new advantages: (i) an easy automation of the coupling, (ii) the analysis of hydrophilic and hydrophobic proteins and (iii) the use of low-cost capillaries