Etude de l'effet de l'oestradiol sur la réendothélialisation

Effect of estradiol in reendothelialization process

• Auteur / Autrice : Cédric Filipe
• Direction : Jean-François Arnal
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiopathologie cellulaire, moléculaire, et intégrée
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules endothéliales

Marqueurs biologiques

Microscopie confocale

Estradiol

Mots clés libres

17-β oestradiol

Réendothélialisation

Imagerie confocale « en face »

Progéniteurs endothéliaux

Résumé

Les travaux menés au sein de notre laboratoire depuis plusieurs années, ont permis de perfectionner un nouveau modèle murin permettant l'étude de la réendothélialisation. Contrairement au modèle classique de agression endovasculaire, qui induit une désendothélialisation stricte de la carotide, le agression périvasculaire, réalisé par l'application d'un champ électrique, induit une décellularisation totale de l'artère. Notre laboratoire a démontré que le 17beta-oestradiol (E2) induisait une accélération de la réendothélialisation et que cet effet était médié par le récepteur alpha des oestrogènes (ER-alpha). La première partie de mon travail a consisté à comparer ces deux modèles : endovasculaire et périvasculaire. Nous avons ainsi démontré que malgré leurs nombreuses différences, dont la présence ou non de cellules musculaires lisses, la réendothélialisation se réalise aussi efficacement. De plus, grâce à l'application de l'imagerie confocale dite " en face ", nous avons décrit les évènements précoces et tardifs de cette cicatrisation endothéliale. L'E2 accélère précocement la migration et augmente la prolifération des cellules endothéliales dans la zone en amont du stress. Trois jours après la lésion périvasculaire, la zone réendothélialisée et la zone en amont du stress sont élargies par l'E2. Enfin, par l'utilisation de souris déficientes pour le domaine transactivateur 1 (AF1), nous avons démontré pour la première fois in vivo, que ce domaine était indispensable aux effets de l'E2. La seconde partie de ma thèse a consisté à déterminer les mécanismes cellulaires et moléculaires, impliqués dans ce processus de réendothélialisation. Afin de comprendre si ce processus de cicatrisation était uniquement un phénomène mettant en jeu des cellules locales, nous avons réalisé le même type d'expériences mais dans un modèle de souris chimères. En greffant de la moelle de souris déficientes en ER-alpha a des souris sauvages, et vice et versa, nous avons ainsi pu mettre en évidence, pour la première fois, qu'une coopération entre la moelle osseuse et les cellules locales était indispensable. . .

Although 17ß-estradiol (E2) accelerates reendothelialization through estrogen receptor alpha (ER-alpha), the molecular and cellular mechanisms underlying this effect are poorly understood. We employed "en face" confocal microscopy (EFCM) to visualize the endothelial regeneration in the conventional endovascular and in a perivascular electric injury model. Healing kinetics and E2 effects were similar in both models. Endothelial cell migration preceded cell proliferation (BrdU-positive cells) and E2 anticipated both processes. EFCM analyses demonstrated the involvement of an adjacent uninjured endothelial zone, which was enlarged by E2, as was the reendothelialized area. Chimeric mice deficient in ER-alpha either in the bone marrow (BM) or in the non-BM compartment revealed an abolition of the E2 effect on reendothelialization as well as on cell proliferation. In mutant mice expressing the 46kD ER-alpha isoform, that is lacking the N-terminal A/B region, E2 accelerated reendothelialization as in wild type mice, providing the first in vivo observation of an E2 effect dependent of ER-alpha that does not require activation function 1. Thus, the acceleration of reendothelialization by E2 relies on the enlargement of the retrograde commitment of endothelial cells to migrate and proliferate, a cooperative effect between BM and non-BM ER-alpha, whereas the A/B region of ER-alpha is dispensable.