Vers un vaccin contre la protéine Tat, une protéine toxique multifonctionnelle libérée par le VIH : (Toward a vaccine against Tat protein, an HIV-specifically released toxin)

• Auteur / Autrice : Jongrak Kittiworakarn
• Direction : André Ménez
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 2003
• Etablissement(s) : Paris, Muséum national d'histoire naturelle
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la nature et de l'Homme - Évolution et écologie (Paris)
• Jury : Président / Présidente : Max Goyffon
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Pascale Debey, André Ménez, Michel Leonetti
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Jacques Couderc, Jean-Marc Danse

Mots clés

Mots clés contrôlés

Emploi en thérapeutique

Toxines

Protéines virales

Thérapeutique

Sida

Protéine Tat

Résumé

Le trans-activateur transcriptionnel (Tat) du VIH-1 est une cible vaccinale potentielle car (1) la réponse immune contre Tat corrèle avec la non progression vers le stade SIDA et (2) Tat peut contribuer au développement de certaines pathologies associées au SIDA. Pour élaborer un toxoi͏̈de nous avons cherché un variant de Tat dépourvu d'activité de transactivation et qui possède des propriétés immunogéniques conservées. Nous avons transfecté une lignée stable exprimant la EGFP de façon Tat dépendante, à l'aide de plasmides exprimant des variants de Tat. Nous avons ensuite mesuré par FACS la fluorescence induite par l'activité de transactivation. Les deux mutations, R52Q,R53Q, diminuent la transactivation mais n'altèrent pas l'immunogénicité. De plus, nous avons montré que TAT induit une réponse humorale sans adjuvant qui dépend des 48 acides aminés N-terminaux. Le variant TAT(R52Q,R53Q) peut constituer un vaccin qui ne requière pas l'emploi d'adjuvant

The trans-activator of transcription (Tat) is a potential HIV vaccine target since (1) an immune response to Tat correlates with non-progression in the disease and (2) Tat may contribute to AIDS-associated pathology. To elaborate a toxoid we searched for a Tat variant with impaired trans-activation activity but with wild type-like immunogenicity. We transfected a stable HL12 cell line expressing a Tat-dependent EGFP by a plasmid expressing Tat variants, and measured fluorescence-based trans-activation activity using FACS. Clearly, the transactivation determinant includes the core, cystein-rich and basic regions of Tat. Two mutations in the basic region, R52Q,R53Q, decreased Tat transactivation activity but did not alter its immunogenicity. Finally, we showed that Tat elicits an antibody response in the absence of adjuvant, due to residues located in its first 48 N-terminal amino acids. R52Q,R53QTat may constitute an anti-Tat vaccine candidate, which may not require the use of adjuvant