Thèse soutenue

Expression d'un marqueur de la fonction mélatoninergique (l'hydroxyindole-o-méthyltransférase) dans l'organe pinéal de poulet

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Auteur / Autrice : Marianne Bernard
Direction : Pierre Voisin
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Poitiers

Résumé

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La melatonine, hormone de nature indolique derivee de la serotonine, est produite dans l'organe pineal des vertebres, selon un rythme nycthemeral presentant un pic nocturne. Cette hormone est impliquee dans la regulation photoperiodique du cycle circadien de repos/activite et des cycles saisonniers de la reproduction. La derniere etape de la voie de synthese de la melatonine est catalysee par l'hydroxyindole-o-methyltransferase (hiomt). Un anticorps dirige contre l'hiomt de poulet et un adnc codant pour cette enzyme ont ete produits au laboratoire et utilises, dans la presente etude, pour etudier la regulation de l'expression de l'hiomt, dans l'organe pineal de poulet. In vivo: au cours de l'embryogenese, la neosynthese de l'hiomt peut etre detectee dans l'organe pineal, 4 jours avant l'eclosion. La cinetique d'accumulation de cette enzyme, pendant le developpement, permet d'identifier deux populations de cellules melatoninergiques. Chez des poulets exposes a la lumiere constante, la concentration de la proteine hiomt et de son arnm est deux fois plus elevee que celle observee en obscurite constante. De plus, notre etude revele que la concentration de cet arnm presente des variations nycthemerales, avec un pic au cours de la journee. Ce rythme semble etre controle par la lumiere et par un oscillateur circadien. In vitro: un analogue de l'ampc permet de restaurer la neosynthese de l'hiomt, dans les cellules pineales en culture. Cet agent permet egalement de declencher cette neosynthese, dans les cellules pineales embryonnaires ou l'enzyme n'est pas exprimee spontanement. Clonage du gene de l'hiomt de poulet: le criblage d'une banque genomique de poulet, avec la sonde d'adnc, a permis d'isoler 3 clones hiomt-positifs, dont un contient la region flanquante en 5 du gene. Le sequencage partiel de ce clone revele des homologies avec des elements regulateurs, rencontres dans d'autres genes eucaryotes