Mécanismes d'interaction de l'intégrateur épigénétique UHRF1 avec l'acétyltransférase TIP60

Interaction mechanisms of epigenetic integrator UHRF1 with TIP60 acetyltransferase

• Auteur / Autrice : Waseem Ashraf
• Direction : Marc Mousli, Christian Bronner
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacologie-pharmacocinétique
• Date : Soutenance le 18/06/2018
• Etablissement(s) : Strasbourg
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Laboratoire de bioimagerie et pathologies (Strasbourg)
• Jury : Président / Présidente : Jean-Luc Bueb
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Monique Dontenwill
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Paola Barbara Arimondo, Béatrice Eymin

Mots clés

Mots clés contrôlés

Épigénomique

Cancérogenèse

ADN -- Altération

Protéines nucléaires

Méthylome

Mots clés libres

UHRF1

TIP60

Interactions protéine-protéine

DNMT1

FLIM

FRET

Méthylation de l’ADN

Histone acétyltransférase (HAT)

UHRF1

TIP60

Protein-Protein interaction

DNMT1

FLIM

FRET

DNA methylation

Histone acetyltransferase (HAT)

Résumé

UHRF1 est une protéine nucléaire responsable du maintien et de la régulation de l'épigénome des cellules. Elle favorise la prolifération cellulaire et est surexprimée dans la plupart des cancers. TIP60, l'un des partenaires le plus important d’UHRF1, est impliqué dans le remodelage de la chromatine et la régulation transcriptionnelle grâce à son activité acétyltransférase. Ensemble, les deux protéines régulent la stabilité et l'activité d'autres protéines telles que la DNMT1 et la p53. Le but de cette étude était d'explorer le mécanisme d'interaction entre UHRF1 et TIP60 en visualisant cette interaction dans les cellules. La microscopie par imagerie à temps de vie de fluorescence et d'autres techniques de biologie moléculaire ont été utilisées. Les résultats ont montré que UHRF1 interagit directement avec le domaine MYST de TIP60 et cette interaction se produit dans la phase S du cycle cellulaire. Les deux protéines ont également montré une réponse similaire aux dommages à l'ADN, ce qui prédit une cohérence dans leur fonction dans le mécanisme de réparation de l'ADN. La surexpression de TIP60 a également induit la baisse du niveau d’UHRF1 et de DNMT1 ainsi qu’une induction d'apoptose dans les cellules ce qui suggère un rôle de TIP60 dans la régulation des fonctions oncogéniques d’UHRF1.

UHRF1 is a nuclear protein maintaining and regulating the epigenome of cells. Its promotes proliferation and is found upregulated in most of cancers. TIP60 is one of the important interacting partner of UHRF1 and is involved in chromatin remodeling and transcriptional regulation through its acetyltransferase activity. Together they regulate the stability and activity of other proteins such as DNMT1 and p53. The aim of this thesis was to explore the mechanism of interaction between UHRF1 and TIP60 by visualizing this interaction in cells. Fluorescent lifetime imaging microscopy and other molecular biology techniques were employed for this purpose. Results of this study showed that UHRF1 interacts directly to the MYST domain of TIP60 and this interaction prevails in the S-phase of cell cycle. Both proteins also showed a similar response to DNA damage predicting a coherence in their function in DNA repair mechanism. Overexpression of TIP60 also downregulated UHRF1 and DNMT1 and induced apoptosis in cells suggesting a role of TIP60 in regulation of oncogenic functions of UHRF1.