Caractérisation du rôle de la région en aval du gène Xist lors de l'inactivation du chromosome X murin par mutagenèse ciblée dans les cellules ES

• Auteur / Autrice : Céline Morey
• Direction : Philippe Clerc
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Génétique Moléculaire et Cellulaire
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Paris 5
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université René Descartes. Faculté de médecine Necker enfants malades (Paris)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Chromosome X

Chromosomes sexuels

Résumé

Chez les mammifères, la compensation de dose des gènes liés à l' X entre les sexes est assurée par l' inactivation transcriptionnelle de l' un des deux chromosomes X, au hasard, chez la femelle. Ce processus dépend des fonctions de comptage et de choix et recquiert l' expression du gène Xist localisé sur le chromosome X. Ce gène produit un grand ARN non-codant qui recouvre le chromosome X inactif. La délétion de 65 kb en aval de Xist, incluant le minisatellite DXPas 34 et l' initiation d' une transcription antisens (Tsix), dans des cellules ES-cellules récapitulant l' inactivation lors de leur différenciation in vitro-induit l'altération du choix et du comptage. Par une stratégie de complémentation cre/oxP, nous avons montré que la restitution de Tsix au site de la délétion de 65 kb dans les cellules XX est insuffisante au rétablissement de l' inactivation aléatoire. . . .

In mammals, dosage compensation of X-linked genes is ensured by X-chromosome inactivation wherby one X chromosome in each female embryonic cell (ES) is chosen at random to become silenced. X-inactivation depends on the counting of X chromosomes and on the choice of the inactive X, It is mediated by the expression of the Xist non-coding RNA wich coats the inactive X and by the Tsix antisense transcipt, a Tsix antisense transcript, a Xist regulator. A 65 kb deletion extending 3' to Xist and including both Tsix and the DXPas34 minisatellite, disrupts choice and counting. Using a cre/loxP site-specific re-insertion strategy in XX deleted ES cells we showed that targeting back, at the 65 kb mutated locus, the Tsix antisense transcription fails to retore random X-inactivation. In contrast, normal counting can be restored in XO deleted ES cells. . .