Etude de l'expression de la sex hormone-binding globulin (SHBG) dans les cellules de la granulosa humaines

• Auteur / Autrice : Thierry Forges
• Direction : Hubert Gérard
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Nancy 1
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Nancy I. Faculté de médecine

Mots clés

Mots clés contrôlés

Immunocytochimie

Valvatides

Immunohistochimie

Progestérone

Oestradiol

Cellules de la granulosa

Résumé

La sex hormone-binding globulin (SHBG), glycoprotéine hépatique, est classiquement considérée comme une protéine de liaison, assurant le transport des stéroïdes sexuels dans le sang et régulant leur biodisponibilité. Cependant, d'autres sites d'expression, ainsi que des récepteurs membranaires spécifiques ont été découverts dans certains tissus. L'interaction de la SHBG avec ces récepteurs déclenche la production d'un second messager et l'apparition d'un effet biologique. Le présent travail a pour but d'étudier l'expression de la SHBG dans les cellules de la granulosa humaines. D'abord, la présence de la protéine a été détectée par immunohistochimie (IHC) dans la granulosa in situ, sur des coupes d'ovaires adultes et fœtaux, et des transcrits de SHBG ont été mis en évidence par RT-PCR dans des extraits d'ovaires. Ensuite, des cellules de la granulosa ont été isolées à partir de liquides folliculaires, obtenus chez des patientes candidates à une fécondation in vitro. A partir de cultures primaires de ces cellules nous avons démontré l'expression de la SHBG in vitro, par IHC et RT-PCR, ainsi que la sécrétion de la protéine dans le milieu de culture, par Western blot. Par cette approche semi- quantitative, certains facteurs régulateurs de l'expression de la SHBG dans ces cellules ont été identifiés, notamment la tri-iodothyronine et l'insuline. Enfin, un effet de la SHBG, en combinaison avec l'œstradiol, sur la production d'adénosine monophosphate cyclique intracellulaire et la sécrétion de progestérone par les cellules de la granulosa a été mis en évidence. Ces résultats suggèrent que la SHBG produite localement joue un rôle dans le fonctionnement folliculaire.