Roles de la chromatine dans la morphogenese du fuseau mitotique

• Auteur / Autrice : RAFAEL EDGARDO CARAZO SALAS
• Direction : ERIC KARSENTI
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La dynamique d'assemblage du fuseau mitotique est un processus delicat qui est essentiel a la duplication correcte du materiel genetique des cellules. Le role de la chromatine dans ce processus a ete identifie pendant longtemps a celui des kinetochores. Neanmoins, des billes en latex recouvertes avec de la chromatine induisent l'assemblage d'un fuseau bipolaire en absence de centrosomes et de kinetochores. Nous montrons dans un systeme ex vivo compose d'extrait d'ufs de xenopus lvis arrete en phase m, de chromatine artificielle et de centrosomes purifies, que la chromatine biaise la croissance dynamique des microtubules de centrosome dans sa direction sans contacter les microtubules directement. Nous montrons aussi que la gtpase ran, impliquee dans le transport nucleocytoplasmique, declenche sous sa forme liee au gtp l'assemblage de microtubules et leur organisation en des fuseaux dans des extraits d'ufs de xenope, en absence de centrosomes, kinetochores et chromosomes, et que la generation de ran-gtp par la proteine associee a la chromatine rcc1, est essentielle pour l'assemblage d'un fuseau meiotique induit par la chromatine. Le role de ran dans l'assemblage des microtubules et du fuseau est, en partie, semblable a son role dans le transport nucleocytoplasmique. La proteine tpx2 est un effecteur en aval de ran qui induit l'assemblage de microtubules dans des extraits d'ufs. Dans ces extraits, ran-gtp declenche l'assemblage de microtubules en dissociant un complexe importine /importine /tpx2 et rend tpx2 libre d'exercer son activite. Enfin, l'inhibition de la generation de ran-gtp empeche l'assemblage de fuseaux mitotiques dans des extraits d'ufs de xenope : ran joue donc un role essentiel aussi dans l'assemblage du fuseau mitotique dans ce systeme. Ainsi, la chromatine interagit avec le cytoplasme qui l'entoure pour permettre l'assemblage des microtubules et des fuseaux : un effet chromatine mitotique est donc essentiel pour l'assemblage du fuseau.