Mecanismes de la division cellulaire chez l'embryon d'oursin : role de la kinesine boursin

• Auteur / Autrice : IRIT TOUITOU
• Direction : Christian Sardet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

La cytocinese est l'etape ultime de la division cellulaire. Afin d'eviter tout probleme d'aneuploidie ou de polyploidie qui decoulerait d'une mauvaise segregation des chromosomes, la cytocinese se doit d'etre en relation etroite avec la mitose au niveau temporel et spatial. Par une approche biochimique systematique reposant sur un systeme de chromatographie d'affinite sur colonne d'actine polymerique et sur colonne de doublets de microtubules axonemaux isoles a partir de flagelles de spermatozoides d'oursins, nous avons isole des proteines d'embryons d'oursin capables d'interagir a la fois avec les filaments d'actine et les microtubules et qui seraient susceptibles de constituer un element du signal de la regulation du clivage. Parmi, ces proteines, boursin, une kinesine de la famille bimc, a ete caracterisee. L'utilisation d'anticorps specifiques a permis de montrer que boursin est fortement exprimee depuis le stade uf jusqu'aux stades de segmentation, qu'elle est associee specifiquement au fuseau tout au long de la mitose puis au midbody en fin de telophase. L'expression d'une boursin mutee dans son site d'hydrolyse de l'atp suite a l'injection des l'arnm correspondants dans des ufs non fecondes est a l'origine de defauts severes dans la division cellulaire et resulte en la formation d'embryons comportant des blastomeres polyploides et multiastraux. L'observation en temps reel des cycles cellulaires de tels embryons montre que les phenotypes observes proviennent de perturbations de l'anaphase et de l'incapacite des blastomeres a realiser la finition de la cytocinese. La formation de l'anneau de clivage et l'initiation de la contraction de celui-ci ne sont pas affectees mais les cellules filles ne se forment que tres rarement suite a une resorption du sillon de clivage. Ces phenotypes different de ceux precedemment observes chez d'autres organismes suite a la perturbation des proteines de la famille bimc.