Thèse soutenue

Régulation de la transcription des gènes de structure de l'hydrogénase de Rhodobacter capsulatus : localisation de séquences cis-activatrices et identification de trans-régulateurs interagissant avec le promoteur hupSLC

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Auteur / Autrice : Régis de Sury d'Aspremont
Direction : Paulette Marie Vignais
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie
Date : Soutenance en 1995
Etablissement(s) : Grenoble 1

Résumé

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Rhodobacter capsulatus est une bactérie pourpre photosynthétique qui est capable de se développer en photohétérotrophie et en chimiohétérotrophie ainsi qu'en autotrophie, en présence d'hydrogène et de dioxyde de carbone. Ce travail a porté sur le rôle, dans la synthèse de l'hydrogenase, de deux protéines contrôlant l'expression de l'opéron de structure de l'hydrogenase. Le site d'interaction de l'ihf de r. Capsulatus avec le promoteur hupslc a été identifié. Sur la base de données génétiques et biochimiques, un modèle d'interaction entre l'ihf et l'adn a ete propose. La protéine hupr a été purifiée après surexpression et se fixe en amont du site de fixation de ihf sur le promoteur. Cette région contient 2 motifs palindroniques. La recherche de protéines affinées pour le promoteur hupslc dans les extraits cellulaires de r. Capsulatus a permis d'identifier une nouvelle protéine (hup-bp). Cette protéine interagit avec une région de 50 nucléotides qui est indispensable pour l'activation de la transcription des gênes de structure de l'hydrogenase. La transcetolase de r. Capsulatus a été purifiée par chromatographie d'affinité sur une colonne heparine-sepharose. Le gène a ensuite été cloné et séquencé