L'amplification de la fibrinolyse : fonction des lysines carboxy-terminales de la fibrine dans la liaison du plasminogene et son activation par la pro-urokinase

Amplification of fibrinolysis: role of carboxy-terminal lysines of fibrin in the briding of plasminogen and its activation by pro-urokinase

• Auteur / Autrice : VALERIE FLEURY
• Direction : Eduardo R. Anglés-Cano
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La fibrinolyse est le processus physiologique de dissolution des caillots de fibrine. Ce phenomene de surface depend de l'activation du plasminogene en plasmine, l'enzyme fibrinolytique, initiee par la liaison du t-pa sur la fibrine. La connaissance approfondie des mecanismes d'amplification de la fibrinolyse peuvent contribuer a l'elaboration de nouvelles strategies en therapie thrombolytique. Nous avons etudie deux mecanismes capables d'amplifier physiologiquement la fibrinolyse: la liaison du plasminogene a la fibrine au cours de sa dissolution, et son activation par la pro-urokinase. L'acceleration de la fibrinolyse est principalement due a l'amplification de la liaison du plasminogene, strictement correlee a l'apparition de lysines carboxy-terminales sur la fibrine, alors que l'affinite reste constante. La liaison du t-pa a la fibrine se caracterise par une affinite elevee et par une faible augmentation du nombre de sites de liaison au cours de la fibrinolyse, cette liaison supplementaire n'etant pas observee en presence d'une concentration plasmatique de plasminogene. Par ailleurs, le t-pa est capable d'activer le plasminogene lie a la fibrine intacte alors que la pro-urokinase ne produit aucune generation significative de plasmine sur cette surface. Au contraire, quand la concentration locale de plasminogene sur la fibrine en cours de degradation augmente, la pro-urokinase devient un activateur efficace. Une etude analytique realisee a l'aide de proteines natives ou mutees, en milieu purifie ou plasmatique, a montre que la pro-urokinase pouvait activer le plasminogene sans etre convertie en urokinase. L'activite intrinseque elevee de la pro-urokinase est stable en milieu plasmatique et represente une veritable source d'activateur du plasminogene