Contribution à l'étude des gènes activés pendant la différenciation érythrocytaire terminale : régulation du gène humain codant la porphobilinogène desaminase

A Contribution to the study of genes that are activated during terminal erythroid differentiation. Regulation of the human gene coding for porphobilinogen deaminase

• Auteur / Autrice : Vincent Mignotte
• Direction : Piotr Słonimski
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1989
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés contrôlés

Gène de la bêta-globine

Résumé

Nous nous sommes intéressés aux mécanismes moléculaires qui régulent l'expression de gènes marqueurs d'une différenciation cellulaire. Notre modèle est la régulation au cours de l'érythropoïèse du gène humain qui code la porphobilinogène desaminase (PBGD). Ce gène possède deux promoteurs; l'un est actif dans toutes les cellules, l'autre uniquement dans la lignée rouge. Ce mémoire traite tout d'abord de la structure de la partie amont du gène PBGD humain, et de la description d'une mutation à l'origine d'un déficit héréditaire en PBGD dans tous les tissus sauf la lignée rouge. Nous décrivons ensuite l'étude de l'expression du gène PBGD humain introduit dans des cellules de phénotype érythroïde ou non érythroïde. Nous montrons que la spécificité tissulaire du promoteur érythrocytaire est dominante sur l'effet d'un enhancer hétérologue place en cis et qu'un fragment de 800 bp de ce promoteur contient des signaux suffisants pour une régulation spécifiquement érythrocytaire. Les interactions entre le promoteur érythrocytaire et des protéines nucléaires ont été étudiées in vitro. Cette étude a été menée parallèlement à celle du promoteur du gène humain de beta-globine. Deux facteurs tissu-spécifiques reconnaissent un fragment du promoteur érythrocytaire du gène PBGD. L'un, nf-e1, se fixe a de multiples séquences dans le gène de beta-globine; l'autre, nf-e2, n'avait pas été décrit auparavant et la séquence qu'il reconnait fixe aussi des protéines de la famille ap1. Enfin, des délétions et des mutations ponctuelles qui détruisent des sites nf-e1 ou nf-e2 abolissent l'inductibilité du promoteur érythrocytaire du gène PBGD lors de la différenciation. Ces résultats suggèrent que des interactions entre plusieurs facteurs érythrocytaires assurent la régulation fine des gènes transcrits dans les cellules rouges.