Stratégie de préservation de la vascularisation des îlots pancréatiques au cours de la transplantation à l’aide d’un modèle de sphéroïde de cellules endothéliales et de cellules à insuline

Strategy for preserving pancreatic islet vascularization during transplantation : a spheroid model composed of endothelial and insulin cells

• Auteur / Autrice : Amira Saidi
• Direction : Laurence Kessler, Florence Toti
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biotechnologies
• Date : Soutenance le 25/04/2025
• Etablissement(s) : Strasbourg
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Nanomédecine régénérative (Strasbourg ; 2018-)
• Jury : Président / Présidente : Eduardo R. Anglés-Cano
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Emily Tubbs, François Faitot
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Eduardo R. Anglés-Cano, Angela Tesse Ragot
• DOI : 10.70675/7276dc65z8f5az4d9fzaba0z706411b82278

Mots clés

Mots clés contrôlés

Diabète insulinodépendant

Pancréas

Transplantation

Mots clés libres

Diabète

Sphéroïdes

Dulaglutide

IBMIR

Transparisation

Microscopie 3D

Diabetes

Spheroids

Dulaglutide

IBMIR

Optical clearing

3D microscopy

Résumé

Le DT1 est une maladie auto-immune avec destruction des cellules β pancréatiques, entraînant une perte de la fonction insulinique et une hyperglycémie en l’absence de traitement. La transplantation d’îlots pancréatiques est une thérapie limitée par une réaction inflammatoire d’ischémie reperfusion, l’IBMIR, responsable de la perte précoce des greffons. Nos résultats montrent que dans un modèle de CEI 2D, le dulaglutide prévient l’EndMT induite par TNF-α/IL-1β et module la voie TGF-β2/Smad (Alk5, Smad2, Smad7). Parallèlement le travail développe un modèle de sphéroïde 3D, stable sur 96h de culture, associant cellules endothéliales intra-insulaires (CEI) et cellules β murines. La mise au point d’un protocole d’immunofluorescence et de transparisation du sphéroïde entier a permis de cartographier la distribution des cellules au sein de la structure 3D et les interactions CEI-cellules β. Ce système standardisé ouvre des perspectives pour le criblage pharmacologique à visée de cytoprotection contre la dysfonction du greffon induite par IBMIR post-transplantation d’îlots.

Type 1 diabetes is an autoimmune disease characterized by the destruction of pancreatic β-cells, leading to loss of insulin function and hyperglycemia in the absence of treatment. Pancreatic islet transplantation is a therapy limited by an ischemia-reperfusion inflammatory reaction, IBMIR (Instant Blood-Mediated Inflammatory Reaction), responsible for early graft loss. Our results demonstrate that in a 2D intra-islet endothelial cell (IEC) model, dulaglutide prevents TNF-α/IL-1β-induced EndMT (Endothelial-to-Mesenchymal Transition) and modulates the TGF-β2/Smad pathway (Alk5, Smad2, Smad7). Concurrently, this work developed a stable 3D spheroid model maintained over 96 hours in culture, incorporating intra-islet endothelial cells (IECs) and murine β-cells. Optimization of a whole-spheroid immunofluorescence and clearing protocol enabled mapping of cell distribution within the 3D structure and IEC-β-cell interactions. This standardized system opens avenues for pharmacological screening aimed at cytoprotection against IBMIR-induced graft dysfunction post-islet transplantation.