Dissection des interactions moléculaires de la glutarédoxine S15 mitochondriale chez les plantes
Auteur / Autrice : | Loïck Christ |
Direction : | Nicolas Rouhier, Jérémy Couturier |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Biologie et écologie des forêts et des agrosystèmes |
Date : | Soutenance le 28/06/2023 |
Etablissement(s) : | Université de Lorraine |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale SIReNa - Science et ingénierie des ressources naturelles (Lorraine) |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Interactions Arbres Micro-organismes (Nancy) |
Jury : | Président / Présidente : Claire Remacle |
Examinateurs / Examinatrices : Nicolas Rouhier, Jérémy Couturier, Sandrine Ollagnier-De Choudens, Benoît D'Autréaux, Claude Didierjean | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Sandrine Ollagnier-De Choudens, Benoît D'Autréaux |
Mots clés
Résumé
Les glutarédoxines sont des protéines retrouvées chez la plupart des organismes vivants et faisant partie de la superfamille des thiorédoxines. Elles interviennent généralement dans la régulation redox via la catalyse de réactions de glutathionylation ou de déglutathionylation, ou dans l’homéostasie du fer via leur capacité à lier et transférer un centre fer-soufre (Fe-S). La glutarédoxine S15 d’Arabidopsis thaliana (GRXS15) joue un rôle central dans la machinerie mitochondriale d’assemblage des centres Fe-S (ISC), à l’interface entre la maturation des protéines à centre [2Fe-2S] et la synthèse des centres [4Fe-4S]. Sa capacité à lier un centre Fe-S est dépendante de l’état redox de son unique cystéine, dont les caractéristiques ont par conséquent été étudiées. Il a notamment été montré que la cystéine de GRXS15 est susceptible de subir différents types d’oxydation réversibles pouvant affecter sa fonction au sein de la machinerie ISC. D’autre part, les glutarédoxines de classe II sont généralement capables de former des hétérodimères liant un centre [2Fe-2S] avec les protéines BOLA. Les expériences réalisées ont permis de montrer que les isoformes mitochondriales, BOLA1 et BOLA4, sont effectivement capables de former un hétérodimère liant un centre Fe-S en interaction avec GRXS15. De plus, les résultats suggèrent que l’hétérocomplexe GRXS15-BOLA4 est capable de transférer son centre [2Fe-2S] afin de permettre la formation d’un centre [4Fe-4S] sur le facteur de maturation tardif NFU4. Par ailleurs, des analyses de complémentation fonctionnelle d’un mutant de levure grx5, effectuées avec plusieurs variants ou chimères de la GRXS15 d’A. thaliana, n’ont pas permis d’identifier les déterminants moléculaires sous-jacents à l’absence de complémentation fonctionnelle par l’isoforme de peuplier observée précédemment, même si l’importance d’un résidu impliqué dans la fixation du glutathion a été confirmée. Enfin, une expérience de co-immunoprécipitation a permis d’isoler et d’identifier plusieurs partenaires potentiels de GRXS15. Parmi eux, se trouvent des membres de la machinerie ISC, mais également des sous-unités de complexes protéiques dont l’activité est impactée dans des lignées d’A. thaliana sous-exprimant GRXS15. Tous ces résultats pourraient suggérer l’existence d’une activité redox, en plus de l’activité de transfert de centre Fe-S.