Exploration du facteur de transcription MAF dans les lymphocytes B humains

Résumé

Les lymphocytes B aux fonctions régulatrices (LBreg) sont décrits pour leur grande hétérogénéité des phénotypes et des mécanismes immunosuppresseurs qui les rend difficiles à identifier. Dans les travaux précédents du laboratoire, le facteur de transcription (FT) MAF a été identifié pour sa surexpression dans les LBreg comparés aux LB pro-inflammatoires. MAF est un FT décrit pour son implication dans la différenciation et son induction d’IL-10 dans les T et macrophages. L’objectif de ce travail était donc de mieux définir les variants et isoformes de MAF, d’explorer son expression dans les B et de comprendre les conditions relatives à son expression. A partir des bases de données et des outils d’analyses in silico, nous avons proposé une meilleure description du FT MAF et des modifications post-traductionnelles impliquant son activité. Cela nous a permis de mettre en place une validation des outils pour la détection de MAF afin de procéder à son étude dans les LB primaires. A partir de B d’amygdales et du sang périphérique, nous avons mis en évidence que MAF est faiblement exprimé à l’état basal et que son expression est associé aux stades les plus différenciés: LB mémoires non commutés, des centres germinatifs et les plasmablastes (PB) de l’amygdale. Dans le sang, son expression est restreinte aux PB. De la même façon, nous avons mis en exergue que l’expression d’IL-10 est associée au stade PB à l’état basal, et correspond au stade qui exprime le plus MAF. Par la suite, nous avons développé un modèle in vitro de production d’IL-10 par les LB, dans lequel MAF est induit de façon synergique à l’IL-10. Enfin, les analyses in vitro ont permis de montrer que les LB IL-10+ ont un enrichissement de l’expression de MAF comparés aux autres LB, mais que l’expression de MAF n’était pas forcément associée à une production d’IL-10. Ces résultats suggèrent que MAF pourrait être impliqué dans la différenciation terminale des LB et qu’il pourrait coopérer avec d’autres FT pour induire leur production d’IL-10.

mots clés

Titre traduit

Exploration of the transcription factor MAF in human B cells
Résumé

B lymphocytes with regulatory functions (LBreg) are described for their heterogeneity of phenotypes and immunosuppressive mechanisms which makes them difficult to identify. In a previous work from the lab, the transcription factor (TF) MAF was identified for its overexpression in LBregs compared to pro-inflammatory B. MAF is a TF with a basic leucine zipper domain described for its involvement in differentiation and its induction of IL- 10 in T cells and macrophages. The objective of this work was to better define the variants and isoforms of MAF, to explore its expression in B cells and to understand the conditions relating to its expression. From databases and in silico analysis tools, we have proposed a better description of FT MAF and posttranslational modifications involving its activity. This allowed us to set up a validation of tools for the detection of MAF in order to proceed with its study in primary B. From B of tonsils and peripheral blood, wehave shown that MAF is weakly expressed at steady state and that its expression in tonsils is associated with the most differentiated B cell stages including unswitched memory B cells, germinal center B cells and plasmablasts (PB). In the blood, its expression is restricted to PB. In the same way, we havehighlighted that the expression of IL-10 is associated with the PB stage in the basal state, and corresponds to the stage which expresses the most MAF.Subsequently, we developed an in vitro model of IL- 10 production by B cells, in which MAF is synergistically induced with IL-10. Finally, in vitro analysis showed that the B IL-10+ have an enrichment of MAF compared to the other B, but that the expression of MAF was not necessarily associated with a production of IL-10.These results suggest that MAF could be involved in the terminal differentiation of B and that it could cooperate with other TFs to induce their production of IL-10.