Peptides glucosylés dans les maladies auto-immunes : stratégies de synthèse et leur application à la détection et à la capture d’anticorps

Glucosylated peptides in autoimmune diseases : synthetic strategies and application to antibody detection and capture

• Auteur / Autrice : Antonio Mazzoleni
• Direction : Jean-Maurice Mallet, Anna Maria Papini
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie moléculaire
• Date : Soutenance le 05/05/2020
• Etablissement(s) : Université Paris sciences et lettres en cotutelle avec Università degli Studi di Firenze
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Chimie moléculaire de Paris Centre (Paris)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Laboratoire des biomolécules (Paris ; 2009-....)
• Partenaire(s) de recherche : établissement de préparation de la thèse : École normale supérieure (Paris ; 1985-....)
• Jury : Président / Présidente : Boualem Sendid
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Jean-Maurice Mallet, Anna Maria Papini, Boualem Sendid, Claudio De Felice, Laurence Mulard, Sara Pellegrino, Frédéric Schmidt, Paolo Rovero
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Claudio De Felice, Laurence Mulard

Mots clés

Mots clés contrôlés

Chimie organique

Mots clés libres

Peptides

Maladies auto-immunes

Glycosylation

Anticorps

Glycoconjugués

Sclèrose en plaque

Peptides

Autoimmune deseases

Glycosylation

Antibodies

Glycoconjugates

Multiple sclerosis

Résumé

Le but principal de ce travail de thèse a été de développer des sondes peptidiques pour détecter et isoler des auto-anticorps spécifiques à haute affinité à partir du sérum de patients souffrant de sclérose en plaques (SEP). Nous avons sélectionné un peptide di-glucosylé de l’adhésine HMW1 comme séquence minimale capable de détecter les anti-N(Glc) IgM. Ainsi, un dextrane de 40 kDa a été modifié avec des groupes propargyle et a été utilisé comme échafaudage pour conjuguer par CuAAC le peptide N-glucosylée. On a prouvé que ce nouveau polymère augmente considérablement la puissance de la liaison des IgG et IgM caractéristique de la forme de SEP que nous venons de caractériser. Les anticorps d'un sérum représentatif ont été purifiés avec succès, comme confirmé par test ELISA. Ce résultat semble prometteur en tant que preuve de concept de la possible déplétion sélective des auto-anticorps circulants dans la SEP, qui pourrait conduire à développer un dispositif thérapeutique spécifique basé sur aphérèse.

The main purpose of this thesis was to develop peptide probes to detect and isolate specific and high affinity antibodies from sera of patients suffering from multiple sclerosis (MS). We selected a di-glucosylated adhesin HMW1 peptide as the shortest sequence up to now able to compete with the highest affinity with anti-N(Glc) IgM binding. 40 kDa dextran was modified with propargyl groups and used as a scaffold to conjugate by CuAAC the di-glucosylated peptide. This novel polymeric structure was proven to dramatically increase binding potency of IgGs and IgMs in MS sera. Abs from a representative MS serum, were successfully purified on a sepharose resin specifically modified with the adhesin peptide-dextran conjugate, as confirmed by ELISA. This result appears promising as a proof-of-concept of the selective removal of circulating autoantibodies (possibly perpetuating nonself recognition) that could likely lead to develop a specific apheresis-based device.