Nanoparticules à base de dendrons cationiques amphiphiles pour l’administration de petits ARN interférents dans le traitement de la polyarthrite rhumatoïde

Amphiphilic cationic dendrons for the delivery of small interfering RNA in the treatment of rheumatoid arthritis

• Auteur / Autrice : Zhibo Yu
• Direction : Elias Fattal, Nicolas Tsapis
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacotechnie et biopharmacie
• Date : Soutenance le 27/10/2020
• Etablissement(s) : université Paris-Saclay
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Innovation thérapeutique : du fondamental à l'appliqué
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Institut Galien Paris-Saclay (Châtenay-Malabry, Hauts-de-Seine ; 1998-....)
• Partenaire(s) de recherche : référent : Université Paris-Saclay. Faculté de pharmacie (Orsay, Essonne ; 2020-....)
• Jury : Président / Présidente : Liliane Massade
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Ling Peng, Chantal Pichon, Jean-Pierre Majoral
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Ling Peng, Chantal Pichon

Mots clés

Mots clés contrôlés

Dendrimères

Polyarthrite rhumatoïde

Nanomédecine

TNF-alpha

Mots clés libres

Dendron amphiphile

SiRNA

TNF-Α

Polyarthrite rhumatoïde

Nanomédecine

Amphiphilic dendron

SiRNA

TNF-Α

Rheumatoid arthritis

Nanomedicine

Résumé

Dans ce travail de thèse, nous avons sélectionné deux dendrons amphiphiles phosphorés (C17P10 et C11P10) pour leur potentiel en tant que système de délivrance de siRNA seul ou en combinaison avec la dexaméthasone (DXM) pour le traitement de la polyarthrite rhumatoïde. Le dendron C17P10 est capable de former des micelles et de complexer des siRNA, formant des dendriplexes qui ciblent TNF-α. Les dendriplexes de rapport N/P (azote/phosphore) de 5 ont été considérés comme un bon compromis en termes de taille, de la bonne affinité des siRNA et des quantités élevées de siRNA pouvant être véhiculés. Les dendriplexes entrainent une bonne inhibition du TNF-α in vitro dans des cellules Raw 264.7 activées par le lipopolysaccharide et un effet anti-inflammatoire significatif dans le modèle murin d‘arthrite rhumatoïde induite par le collagène. A l’issue des études in vitro et in vivo, l'effet des siRNA vectorisés par les siRNA s’est montré dose-dépendant et séquence-spécifique. Les dendriplexes ont pu induire une accumulation des siRNA dans les articulations inflammées par extravasation par voie vasculaire fuyante et séquestration à médiation cellulaire inflammatoire (ELVIS). Les dendrons amphiphiles (C11P10) portant une chaîne aliphatique C11 possèdent la capacité d’encapsuler la dexaméthasone et les siRNA par interaction électrostatique formant des dendriplexes nanostructurés chargés en DXM. Les dendriplexes chargés en DXM de rapport molaire dendron / DXM de 5 et de rapport N / P de 5 se sont révélés un bon compromis en terme de liaison des siRNA, des doses de DXM et de siRNA pouvant être injectées. Une activité anti-inflammatoire synergique de la dexaméthasone et des siRNA a été confirmée dans des cellules Raw 264.7 activées par le LPS. Nous pouvons conclure que les dendrons sont des vecteurs puissants et flexibles pour la délivrance de siRNA. Même s'il reste encore à étudier leur innocuité, ils semblent aussi efficaces que les lipides ou les polymères cationiques dans l'inhibition de TNF-α.

We have screened out two amphiphilic phosphorus dendrons (C17P10 and C11P10) for their potential as delivery system for siRNA alone or in combination with dexamethasone (DXM) for the treatment of rheumatoid arthritis. C17P10 dendron can form micelles and bind TNF-α siRNA forming dendriplexes. Dendriplexes at the N/P (nitrogen/phosphorus) ratio of 5 were considered as a good compromise between size and good binding affinity for high siRNA concentration. They presented a good inhibition of TNF-α in vitro and significant anti-inflammatory effect in CIA mice model. The dose and sequence-dependent effect of siRNA in dendriplexes were demonstrated both in vitro and in vivo. Dendriplexes were able to induce siRNA accumulation in the inflamed paw by Extravasation through Leaky Vasculature and subsequent Inflammatory cell-mediated Sequestration (ELVIS). Amphiphilic dendrons (C11P10) bearing C11 aliphatic chain possess the capacity of loading dexamethasone and bind TNF-α siRNA through electrostatic interaction forming nanostructured DXM-loaded dendriplexes. DXM-loaded dendriplexes at the dendron/DXM molar ratio of 5 and the N/P ratio of 5 were a good compromise between good binding, high DXM dose, and high siRNA concentration. A synergistic anti-inflammatory activity between dexamethasone and siRNA was confirmed in LPS-activated Raw 264.7 cells. We believe that dendrons are potent and flexible carriers for siRNA delivery. Even if more need to be discovered about their innocuity, there are at least as much efficient as many cationic lipid or polymers in the inhibition of TNF-α.