L'expression d'HVEM est complémentaire à celle de PD-L1 dans le mélanome à la fois en terme d'expression et de régulation et est un facteur de mauvais pronostic faisant d'HVEM une cible thérapeutique potentielle dans le mélanome

HVEM has a broader expression than PD-L1 in melanoma and constitutes a pejorative prognostic marker and potential treatment target for melanoma

• Auteur / Autrice : Nausicaa Malissen
• Direction : Daniel Olive
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pathologie humaine. Oncologie
• Date : Soutenance le 20/03/2018
• Etablissement(s) : Aix-Marseille
• Ecole(s) doctorale(s) : Ecole Doctorale Sciences de la Vie et de la Santé (Marseille)
• Jury : Président / Présidente : Romain Roncagalli
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Romain Roncagalli, Corine Bertolotto, Bruno Quesnel, Christine Ménétrier-Caux, Nathalie Auphan-Anezin
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Corine Bertolotto, Bruno Quesnel

Mots clés

Mots clés contrôlés

Récepteurs immunologiques

usage thérapeutique

Antinéoplasiques

traitement médicamenteux

Mélanome

Membre-14 de la superfamille des récepteurs au TNF

Mots clés libres

Mélanome

Melanoma

Résumé

HVEM est une molécule exprimée à la surface des mélanomes (M) qui pourrait contribuer à la croissance tumorale en se liant à BTLA, un co-récepteur inhibiteur exprimé par les lymphocytes T infiltrants les tumeurs (TILs). Nos objectifs étaient 1-d’explorer la valeur pronostique de l’expression d’HVEM par les M; 2-de confirmer l’existence d’une interaction HVEM/BTLA in vivo à l’interface mélanome-TILs; 3- de comprendre les mécanismes de régulation d’HVEM..Méthodes: L’expression d’HVEM a été analysée par immunohistochimie et corrélée à la survie globale des patients. Ces résultats ont été renforcés par l'étude de données transcriptomiques du TCGA. L’analyse de l’expression d’HVEM à la surface des cellules de M et de BTLA à la surface des TILs a été réalisée par cytométrie en flux et co-immunoflorescence afin de confirmer l’existence d’interactions HVEM-BTLA in vivo. Enfin, les mécanismes de régulation d’HVEM ont été explorés par des analyses bio-informatiques couplées à des techniques de siRNA.Résultats : Les patients ayant une expression élevée d’HVEM par leur M avaient une survie globale significativement plus réduite que ceux ayant une expression faible d’HVEM à la fois en immunohistochimie (p= 0,0124) et en transcriptomique (p=0,0282).D’un point de vue mécanistique: HVEM exprimé par les M interagissait avec BTLA exprimé par les TILs et l’expression d’HVEM n’était ni liée au statut mutationnel, ni induite par l’interféron gamma . Nous avons également montré que les gènes co-exprimés avec HVEM formaient une signature d’agressivité et que MITF contrôlait l’expression d’HVEM.Conclusion : HVEM ou BTLA pourraient être des cibles thérapeutiques de choix dans le M.

Purpose: Upon engagement with HVEM, BTLA triggers inhibitory signals in T cells. Using melanoma, we correlated HVEM expression with clinical outcomes and confirmed the occurrence of HVEM-BTLA interaction inside melanoma. Moreover, we determined regulatory mechanisms accounting for the complementary pattern of expression we observed for HVEM and PD-L1.Experimental design: HVEM expression levels were analyzed by immunohistochemistry in melanoma metastases and correlated with overall survival (OS). Coincident expression of HVEM and its ligand BTLA was studied in tumor cells and tumor-infiltrated-lymphocytes (TILs) by flow cytometry and co-immunofluorescence. Candidate genes controlling HVEM expression on melanoma were defined by bioinformatics studies and validated by siRNA.Result: Patients with high HVEM expression on melanoma cells had a significantly poorer OS than those with a low expression as documented by immunohistochemistry (p=0.0124) and TCGA (p=0.0282). From a mechanistic point of view, we showed (1) that HVEM expressed at the surface of melanoma cells interacts with BTLA expressed by TILs, (2) that HVEM expression is neither linked to the melanoma mutational status nor inducible by IFN 3) that genes co-expressed with HVEM are associated with an aggressive gene signature, and (4) that MITF controls HVEM expression.Conclusion: In contrast to PD-L1, HVEM expression is constitutive and correlated with the expression of genes involved in aggressive features. Therefore, high HVEM expression on melanoma cells is a pejorative prognostic marker, substantiating the use of checkpoint inhibitors directed at HVEM and BTLA in the treatment of melanoma