Thèse de doctorat en Sciences de la vie, spécialité Biologie de la reproduction
Sous la direction de Pascal Mermillod et de Marie Saint-Dizier.
Soutenue le 20-12-2017
à Tours , dans le cadre de École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire) , en partenariat avec Physiologie de la Reproduction et des Comportements (Tours) (équipe de recherche) .
Le président du jury était Thierry Moreau.
Le jury était composé de Jean-Philippe Wolf.
Les rapporteurs étaient Sylvie Chastant-Maillard, Manuel Avilez Sanchez.
Le stockage et la maturation finale des spermatozoïdes, la fécondation et le développement embryonnaire précoce se déroulent au sein de l’oviducte. Afin de mieux comprendre la régulation de ces événements, un pool de fluides tubaires issus d’une centaine de vaches a été analysé pour son contenu en hormones stéroïdiennes, en protéines et en métabolites par chromatographie couplée à la spectrométrie de masse et par spectroscopie RMN. D’importantes régulations du stéroïdome, du protéome et du métabolome du fluide tubaire ont été mises en évidence au cours du cycle estrien et en fonction du côté de l’ovulation. Dans une deuxième partie, nous avons montré que les spermatozoïdes liés aux cellules épithéliales d’oviducte sont libérés par l’action de la progestérone et acquièrent par cette liaison-libération un pouvoir fécondant supérieur. L’estradiol inhibe l’action libératrice de la progestérone, ce qui suggère une régulation du réservoir spermatique par les hormones stéroïdiennes en période péri-ovulatoire. Dans une troisième partie, une analyse protéomique a permis d’identifier et de quantifier des protéines du fluide tubaire interagissant avec les spermatozoïdes bovins à différents stades du cycle estrien.
Regulation of oviductal fluid and sperm-oviduct interactions in bovine
The storage and final maturation of spermatozoa, fertilization and early embryo development take place within the oviduct. In order to better understand regulation of these events, a pool of oviductal fluid from a hundred cows was analyzed for its content in steroid hormones, proteins and metabolites using chromatography coupled with mass spectrometry and RMN spectroscopy. Important regulations of the steroidome, proteome and métabolome in the oviductal fluid were highlighted according to the stage of the estrous cycle and the side relative to ovulation. In a second part, we showed that sperm cells bound to oviductal epithelial cells were released by progesterone action and acquire a higher fertilizing ability by this binding-releasing. The estradiol inhibit the releasing induced by progesterone suggesting a regulation of the sperm reservoir by steroid hormones in the peri-ovulatory period. In a third part, a proteomic analysis allowed to identify and quantify proteins of the oviductal fluid that interact with bovine sperm cells at different stages of the estrus cycle.
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