Mise au point d’un immunocapteur pour le diagnostic infra-clinique de la maladie parodontale en prothèse fixée : validation d’un protocole de fonctionnalisation d’une surface d’or pour la détection des interleukines 6 et 8 dans le fluide gingival

par Néné Thioune

Thèse de doctorat en Physique des matériaux - spécialité Sciences odontologiques

Sous la direction de Marc Lamy de la Chapelle et de Henri Michel Benoist.

Soutenue le 25-07-2015

à Sorbonne Paris Cité en cotutelle avec l'Université Cheikh Anta Diop (Dakar) , dans le cadre de École doctorale Galilée (Villetaneuse, Seine-Saint-Denis) , en partenariat avec Université Sorbonne Paris Nord (Bobigny, Villetaneuse, Seine-Saint-Denis ; 1970-....) (établissement de préparation) et de Laboratoire Chimie, structures et propriétés des biomatériaux et d'agents thérapeutiques (Villetaneuse, Seine-Saint-Denis) (laboratoire) .

Le président du jury était Henri Michel Benoist.

Le jury était composé de El Hadji Mbodj, Tandakha Ndiaye Dieye.

Les rapporteurs étaient Benjamin Djeredou, Souhir Boujday.

mots clés

• Fluide gingival
• Biocapteurs
• Interleukines
• Prothèses dentaires partielles fixes
• Gingivite
• Monocouches moléculaires autoassemblées

Résumé

Introduction. Le contexte de ce travail est le développement d’un capteur visant à détecter des protéines pro-inflammatoires (interleukines : IL-6, IL-8) dans le fluide gingival après pose d’une prothèse unitaire fixée. La détection de ces protéines en faible concentration sera assurée par des phénomènes physiques. Or, ces protéines ne se fixent pas directement sur la surface du capteur et il devient nécessaire de fonctionnaliser la surface. Ce travail préliminaire porte sur la validation du protocole de fonctionnalisation de surface. Matériels et méthodes : Plusieurs stratégies de fonctionnalisation ont été explorées les unes après les autres. Dans un premier temps, l’utilisation des nanobâtonnets d’or ou GNRs utilisés comme capteur sans marquage. L’interaction entre les protéines modèles et les GNRs ont été caractérisé par UV-vis. Dans un second temps, le protocole de fonctionnalisation consiste à accrocher directement les anticorps monoclonaux sur des surfaces d’or ou par l’intermédiaire d’une monocouche auto-assemblée simple (PEG ou DSP) ou mixte (MAU /MOH). Ce protocole a été caractérisé par QCM, SPR et PM-IRRAS et RAMAN.Résultats et conclusions : Les résultats trouvés avec les GNRs sont encourageants et méritent d’être approfondis d’une part et d’autre part les travaux de fonctionnalisation sont plus concluants. Ils ont permis de valider un protocole de fonctionnalisation d’une surface or par une monocouche auto-assemblé mixte couplé au greffage d’anticorps. Ce procédé est plus efficace car la sélectivité et la sensibilité du capteur est plus importante. Ce biocapteur une fois conçu, permet un champ d’application très large en recherche fondamentale et clinique et peut être un nouvel outil diagnostique et pronostique au cabinet dentaire. Il constitue une alternative idéale au test d’ELISA.

mots clés

• Gingival fluid

Titre traduit

Development of an immunosensor for subclinical diagnosis of periodontal disease in fixed prosthesis : Validation of a functionalization protocol of a gold surface for detection of pro-inflammatory proteins in the crevicular fluid

Résumé

Non communiqué