Rôle de la protéine "Disc Large" dans les cellules de la paroi vasculaire humaine

par Oumou Maiga

Thèse de doctorat en Biologie et pharmacologie de l'hémostase et des vaisseaux

Sous la direction de Dominique Pidard et de Laurence Walch.

Soutenue en 2012

à Paris 7 .

mots clés

• Muscles lisses vasculaires
• Protéines adaptatrices de la transduction du signal
• Techniques de double hybride
• Protéines membranaires

Résumé

Les protéines d'architecture jouent un rôle fondamental dans l'organisation des réseaux d'interactions protéiques. Ces protéines sont constituées de multiples domaines d'interaction protéine-protéine leur permettant de participer au regroupement, à l'adressage fonctionnel et à la coordination des activités des différents membres d'un complexe multiprotéique. Au cours de ce travail, nous nous sommes intéressés à l'expression et aux fonctions d'un membre de la famille des protéines d'architecture « membrane-associatedguanylate kinase » (MAGUK), la protéine « Disc large » (Dlg), aussi connue sous le nom de « synapse-associatedprotein-97 », dans les cellules constitutives de la paroi vasculaire humaine. Afin d'appréhender le rôle de Dlg dans ces cellules, nous avons cherché à identifier ses protéines partenaires à travers deux méthodes protéomiques, la technique du double hybride chez la levure, et celle de la co-immunoprécipitation couplée à la spectrométrie de masse. L'analyse des interactions mises en évidence a permis de suggérer l'implication de Dlg dans la régulation de la voie de signalisation « extracellular signal-responsive kinase » (ERK) dans les cellules musculaires lisses vasculaires, et sa contribution dans le trafic intracellulaire dans les cellules endothéliales microvasculaires. L'ensemble de ce travail permet de mieux comprendre la fonction de Dlg dans la paroi vasculaire et offre de nouvelles perspectives d'études.

Titre traduit

Role of the Disc Large scaffold protein in the vascular wall cells

Résumé

Scaffold proteins play a key role in the organization of protein interaction networks. These proteins are made of multiple protein-protein interaction domains that allow them to bring together different members of a multiprotein complex, to address this complex at specific areas of the cell and to coordinate its activities. In this work, we looked for the expression and functions of a member of the architecture protein family, membrane-associated guanylate kinase (MAGUK), the protein Disc large (Dlg), also known as the synapse-associated protein-97, in the human vessel wall. Thus, we show for the first time the expression of this protein in vascular smooth muscle cells and in microvascular endothelial cells. In order to understand the role of Dlg in these cells, we sought to identify their partner proteins through two proteomic approaches, the yeast two-hybrid method, and co-immunoprecipitation coupled with mass spectrometry. The analysis of identified interactions has highlighted the involvement of Dlg in the regulation o extracellular signal-responsive kinase (ERK) signaling pathway in smooth muscle cells, and suggests its contribution to the intracellular trafficking in endothelial cells. This work provides insight into the function of Dlg in the vascular wall and offers new perspectives for studies.