Thèse soutenue

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Auteur / Autrice : Nadia Hezzaz-Bouchahm
Direction : Philippe Rieu
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Médecine. Biochimie et biologie moléculaire
Date : Soutenance en 2010
Etablissement(s) : Reims

Résumé

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L’@insuffisance rénale chronique est associée à une augmentation du stress oxydant. Celui-ci est dû à une surproduction de formes réactives de l’oxygène et à une diminution des défenses antioxydantes. Il participe aux complications associées à l’urémie, en particulier aux complications cardiovasculaires. Il est mesuré par quantification des produits terminaux d’oxydation. L’objectif de la thèse a été de mettre au point les techniques de dosage de plusieurs marqueurs du stress oxydant d’une part et d’étudier in vivo, l’influence d’une membrane de dialyse antioxydante (Vitabran ; polysulfone greffée en vitamine E) sur le stress oxydant et la formation des produits avancés de glycation chez les patients en hémodialyse conventionnelle, d’autre part. Nous avons réévalué le dosage des S-nitrosothiols (RSNO) par fluorimétrie en utilisant le Diaminonaphtalène (DAN) chez des sujets insuffisants rénaux chroniques (IRC). Initialement décrit pour la détermination des nitrites et des RSNO dans les échantillons environnementaux, ce dosage a ensuite été utilisé pour mesurer ces composés dans les matrices biologiques. Nous montrons qu’avec quelques modifications cette technique peut être utilisée pour détecter des concentrations plasmatiques de nitrites de l’ordre du nanomolaire. Nous montrons que les taux de nitrite plasmatique sont identiques chez les sujets témoins et les patients dialysés. Par contre, cette technique de mesure ne permet pas de mesurer les taux de RSNO plasmatiques. Nous avons également mis au point les techniques pour mesurer la peroxidation lipidique (TBARS ; thiobarbituric acid reactive substances), l’oxydation des protéines (AOPP ; advanced oxidative protein products) et la pentosidine, un produit avancé de glycoxydation. Nous avons ensuite étudié l’effet d’une membrane VitabranE, constituée de polysulfone recouverte de vitamine E, sur les marqueurs de stress oxydant et sur l'activation des polynucléaires neutrophiles. Il s’agit d’une étude prospective, randomisée, en cross-over, incluant 36 patients en hémodialyse chronique comparant des dialyseurs en polysulfone (PS) et des dialyseurs en polysulfone contenant de la vitamine E (PS-VE). Nous n’avons pas trouvé de différence significative entre ces deux dialyseurs en ce qui concerne le taux plasmatique de pentosidine, de TBARS et d’AOPP, la bioincompatibilité testée par l'activation des neutrophiles était identique avec les deux dialyseurs. Cette étude n’a pas montré d’effet antioxydant de la membrane Vitabran, recouverte de vitamine E, sur le stress oxydant chez les sujets hémodialysés. Il est possible que l’amélioration de la biocompatibilité des membranes en polysulfone, ne permette plus d’observer l’effet antioxydant des membranes de dialyse recouvertes de vitamine E. Une seconde possibilité est que l’effet antioxydant de la membrane Vitabran ne s’exerce pas sur toutes les réactions d’oxydo-réduction mais plutôt sur la peroxydation lipidique, la vitamine E étant un antioxydant liposoluble. Notre étude n’était pas assez puissante pour montrer une petite différence des marqueurs de peroxydation lipidique. Il faudrait envisager une étude avec un nombre de patients plus important et des techniques de dosage plus spécifiques. .