Régulation des molécules HLA de classe I classiques et de CD1a : rôle de la molécule CD99 au cours de la génération de cellules dendritiques

par Karim Mahiddine

Thèse de doctorat en Interactions moléculaire et cellulaire

Sous la direction de Ghislaine Bernard et de Alain Bernard.

Soutenue en 2010

à Nice .

mots clés

• Cellules dendritiques
• Antigènes CD
• Facteurs de transcription

Résumé

CD99 est une molécule ubiquitaire, exprimée selon un ou deux isoformes, suivant le type cellulaire qui la porte. Nous avons établi que CD99 contrôle le transport des molécules HLA de classe I, du TGN vers la membrane plasmique. De plus, ce mécanisme est soumis à une régulation transcriptionnelle, influencée par l’expression des isoformes de CD99 et qui implique également la molécule CD1a. Cette régulation est conditionnée par l’expression de l’isoforme longue de CD99 (CD99LF), contrôlant la phosphorylation des facteurs de transcription ATF-2 CREB-1. La forme courte de CD99 est requise pour inhiber la voie de signalisation induite par CD99LF. Cette régulation par CD99 trouve son intérêt lors de la génération in vitro de cellules dendritiques immatures (iDCs) humaines, sur la régulation de l’expressionde CD1a. La différenciation de monocytes CD14+ en iDCs est ainsi caractérisée par un « switch » de l’expression de la molécule CD99 : les monocytes CD14+ expriment majoritairement CD99LF. Les iDCs expriment, quant à elles, des niveaux comparables des deux isoformes. Nous avons montré que ce « switch » de CD99 est indispensable à l’expression de CD1a. Les maturation des iDCs est caractérisée par un second « switch » conduisant à l’expression majoritaire de CD99LF, régulant probablement l’expression des molécules HLA de classe I. Une meilleure compréhension du contrôle de l’expression de ces deux familles de molécules par CD99 dans iDCs est cruciale, notamment grâce à leur rôle clef dans l’activation des cellules T CD8+ ainsi que des cellules T CD1a-restreintes et donc dans la régulation des réponses immunes face aux antigènes peptidiques et glycolipidiques.

Titre traduit

Transcriptional regulation of HLA class I and CD1a molecules : involvement of CD99 molecule during the human dendritic cells generation

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Résumé

Dentritic cells (DCs) are the most effective Antigen Presenting Cells (APCs), playing a major role on the activation of CD1a-restriced T-cells. This activation requires expression of CD1a molecule at the DC plasma membrane. Here we report that CD1a transcription and expression is regulated by a mechanism including both long and short CD99 isoforms (CD99LF and CD99SF). We provide here that CD1a transcription is allowed by a switch expression form CD99LF to comparable expression of both CD99 isoforms during the iDCs differentiation process in vitro. In this study, we demonstrate that CD99LF maintains a lower level of CD1a transcription by up-regulating the phosophorylated form of ATF-2 transcription factor. The CD99SF is required for counteracting this regulatory mechanism. We also suggest that the CD99LF induced mechanism is probably not restricted to CD1a, but is extended to classical MHC class I transcription, by modulating CREB-1 phosphorylation level. Elucidation of molecular mechanisms related to CD99 alternative splicing could be very helpful in the aim to have a better understanding of the transcriptional regulatory mechanism of CD1a and class I molecules during the DCs generation and activation steps.