L’élimination des microorganismes par les neutrophiles (PMN) est mediée par l’activité des formes réactives de l’oxygène (FRO), produites suite à l’activation de la NADPH oxydase, dont l’efficacité est sensiblement augmentée par la myélopéroxydase, MPO, (mécanismes oxydatifs) et par l’action des protéines bactéricides contenues dans les granules cytoplasmiques (mécanismes non oxydatifs). L’implication directe des FRO et de la MPO dans la bactéricidie des PMN a été récemment remise en question. Nous nous sommes proposés de réexaminer les mécanismes impliqués dans la bactéricidie des neutrophiles sur la base des nouvelles hypothèses récemment proposées en appliquant une méthode de mesure du « killing » des microorganismes que nous avons récemment mise au point et qui permet une estimation plus correcte de la bactéricidie. Nous avons démontré que l’activité NADPH oxydase est indispensable pour le « killing » de certains microorganismes (S. aureus et C. albicans) mais pas pour d’autres (E. coli) qui sont efficacement éliminés même en l’absence du burst respiratoire. Les flux d’ions K+ et l’alcalinisation du pH intraphagosomale, induits par l’activation du complexe oxydase, ne sont pas nécessaires au killing de S. aureus et C. albicans, microorganismes dont la bactéricidie NADPH oxydase dépendante est mediée presque exclusivement par la MPO. Les courants des ions K+, à travers des canaux BKCa-like, semblent être responsables du killing résiduel des PMN MPO déficients, après une longue incubation. Nous avons aussi étudié les mécanismes impliqués dans la bactéricidie des PMN en utilisant comme modèle cellulaire la lignée PLB-985 différentiable en « pseudo-neutrophiles ». Nous avons prouvé que la réponse de ces cellules aux stimuli particulaires est sensiblement plus faible par rapport aux PMN. Ce burst respiratoire support e une bactéricidie comparable à celles des PMN pour des temps courts d’incubation (<10 min) vis-à-vis des microorganismes sensibles aux mécanismes de « killing » oxygène-dépendants (S. aureus et C. albicans); toutefois, en prolongeant les temps d’incubation, le pouvoir bactéricides ce ces cellules est abolit. Le « killing » NADPH oxydase indépendant d’E. coli est aussi partiellement déficitaire. La superproduction de FRO mise en évidence dans les cellules mutantes PLB-985 DloopNox4-Nox2 (où la deuxième boucle intracellulaire de Nox2 a été remplacée par celle de l’oxydase homologue Nox4) en réponse aux stimuli solubles et particulaires n’est pas accompagnée par une augmentation du « killing ». Le faible pouvoir bactéricide de cette lignée cellulaire est du au contenu réduit en cytochrome b558 (un dixième par rapport aux PMN) et aux défauts plus ou moins importants des protéines granulaires (MPO, elastase, cathepsine G, lactoferrine, lysozyme, MMP8 et MMP9) impliquées dans le processus de bactéricidie: dans les cellules PLB-985 différentiées au DMF, les mécanismes bactéricides oxygènes dépendants et indépendants sont donc tous deux compromis. Le dysfonctionnement du complexe NADPH oxydase est à la base d’une maladie génétique rare, la granulomatose septique chronique (CGD). Nous nous sommes intéressés à la caractérisation d’un cas atypique de CGD, la forme X91-. Nous avons démontré que la nouvelle mutation identifiée (insertion d’un T en position -54T/-56T) compromet l’association des facteurs de transcription ets avec la région promotrice, empêche, par conséquence, l’expression normale du gène dans les neutrophiles et détermine une activité oxydase réduite. Ce burst respiratoire résiduel (6% du control) n’est pas suffisante pour soutenir, in vitro, une activité de « killing » vis-à-vis de S. aureus et C. albicans ni pour protéger le patient des infections sévères et récidivantes.