Développement du radiomarquage des protéines à l'aide de technétium et de gallium : mise au point sur des immunoglobulines et application à l'annexine A5 en vue de détecter la mort

par Marie-Laure Biechlin-Chassel

Thèse de doctorat en Radiopharmacie

Sous la direction de François-Noël Gilly.

Soutenue en 2008

à Lyon 1 .

mots clés

• Gallium -- Composés
• Protéines -- Marquage par affinité

Résumé

Le présent travail a consisté à développer des méthodes de marquage de protéines à l’aide de technétium 99m et de gallium. Les techniques ont été mises au point sur des -globulines puis appliquées à l’annexine A5, marqueur de mort cellulaire in vivo. Le marquage au 99mTc a consisté à dériver les protéines à l’aide de 2-iminothiolane afin de générer des groupements thiols libre servant de point d’ancrage au cœur 99mTc-tricarbonyl. Cette méthode originale s’est révélée particulièrement efficace, notamment en comparaison de la stratégie de référence utilisant le groupement HYNIC. Le marquage au gallium a été réalisé à l’aide de 67Ga, après dérivation des protéines à l’aide d’anhydride de DTPA. D’intéressant résultats ont été obtenus et devront être confirmés ultérieurement à l’aide de 68Ga, émetteur de positrons

Titre traduit

Development of new radiolabelling strategies with technetium and gallium : assays on immunoglobulins and application to annexin A5 in the perspective of visualizing cell death in vivo

Résumé

The aim of this study was to develop new radiolabeling methods of proteins with technetium 99m and gallium. Proteins of interest like immunoglobulins or annexin A5, which can be used to detect cell death in vivo, were used. Free thiols groups were first generated on their surfaces after reaction with 2-iminothiolane. Derivatized proteins were then radiolabeled with 99mTc-tricarbonyl. This new strategy permited to obtain very encouraging results in comparison to the « HYNIC » method, considered as the reference Radiolabelings with gallium were performed using 67Ga after derivatization of proteins in presence of DTPA anhydride. The interesting results obtained have now to be confirmed with 68Ga, a positron emitter