Rôle des facteurs vasoactifs (NO et endothéline-1) et des canaux KATP dans les anomalies vasculaires pulmonaires de la hernie diaphragmatique congénitale expérimentale du fœtus d’agneau

par Anthony De Buys Roessingh

Thèse de doctorat en Physiopathologie

Sous la direction de Anh-Tuan Dinh-Xuan.

Soutenue en 2007

à Paris 12 .

mots clés

• Hernie diaphragmatique
• Hypertension artérielle pulmonaire
• Facteurs EDCF
• Poumon -- Vaisseaux sanguins

Résumé

Les enfants nés avec une hernie diaphragmatique congénitale (HDC) ont un pronostic sombre et la mortalité avoisine 50%. Le traitement médical consiste à lutter contre une hypertension artérielle pulmonaire persistante (HTAPP) due à une hypoplasie pulmonaire. Le but de nos travaux est de créer une HTAPP chez les foetus de brebis. Nous avons créé une HDC chirurgicalement à 80 jours de gestation. Les animaux ont été ensuite étudiés à 138 jours de gestation (le terme étant de 145 jours) avec la mise en place de cathéters de mesure de la pression sanguine et de débits sanguins. In vivo, nous avons testé l'effet d'activateurs et d'inhibiteurs des canaux potassiques dépendant de l'ATP (KATP). Nous avons étudié l'effet de la NO synthase neuronale (NOSn), productrice du NO, de son second messager, le guanosine 3'-5' monophosphate cyclique (GMPc) et de la guanylate cyclase (GC), productrice du GMPc. Nous avons également testé l'effet de la ventilation mécanique sur la réactivité pulmonaire. In vitro, nous avons utilisé des bains d'organe afin de tester les mêmes médicaments que ceux testés in vivo, puis de l'immunohistochimie et du Western Blot pour confirmer l'existance de canaux KATP et de la (NOSn). Nous démontrons ainsi que l'activation des canaux KATP permet de diminuer la résistance vasculaire pulmonaire (RVP) à la naissance ; que la NOSn est présente dans les poumons de brebis herniés à la naissance mais qu'elle ne modifie pas la RVP ; que la voie du NO/GMPc est une voie de signalisation inter- et intracellulaires importantes impliquées dans la modulation du tonus vasculaire pulmonaire à la naissance ; que la ventilation induit une forte diminution de la RVP.

Titre traduit

Role of vasoactive factors (NO and endothelin-1) and ATP-dependent potassium channels in pulmonary vascular disorders of fetal lambs with congenital diaphragmatic hernia

Pas de résumé disponible.

Résumé

Treatment of congenital diaphragmatic hernia (CDH) challenges obstetricians, pediatric surgeaons and neonatologists. Persistent pulmonary hypertension associated with lung hypoplasia in CDH leads to a high mortality rate. We have assessed, both in vivo and in vitro, the effect of potassium channel ATP-dependant (KATP) openers and blockers, the effect of neuronal nitric oxide synthase (nNOS), the effect of the cyclic guanosine 3'-5' monophosphate (cGMP). The effect of the enzymes guanylate cyclase (GC) and phosphodiesterase (PDE V) and the effect of mechanical ventilation in near full-term lambs without and with CDH surgically created at 85 days of gestation. In vivo pulmonary hemodynamics were assessed at 135 days, by means of catheters inserted into the main vessels and ultrasonic flow transducers placed around the left pulmonary artery and the aorta. Isolated pulmonary vessels from lambs with and without CDH were used to test the effect of the same drugs in vitro, then we used immunohistochemistry and Western Blot to detect the presence of KATP channels and nNOS in pulmonary tissue. KATP openers significantly reduced pulmonary vascular resistance (PVR) in both controls and CDH animals. NNOS protein is present in the lungs of near full-term lamb fetuses with CDH, but it does not contribute to the reduction of PVR. GC and PDE V play a role in controlling pulmonary vascular tone in fetal lambs with or without CDH. Both enzymes seem to be impaired in fetal lambs with CDH. Ventilation induced a reduction of pulmonary vascular tone at birth in lambs with CDH and NO seems to contribute to this reduction.