Rôle de la cellule musculaire lisse bronchique dans la physiopathologie de l'asthme
par Thomas Trian
Thèse de doctorat en Sciences biologiques et médicales. Biologie - Santé
Sous la direction de Patrick Berger.
Soutenue en 2007
à Bordeaux 2 .
mots clés-
Résumé
L'inflammation et le remodelage musculaire lisse bronchique sont deux caractéristiques majeures de l'asthme. L'objectif de ce travail est d'étudier le rôle physiopathologique de la cellule musculaire lisse (CML), en particulier de préciser, d'une part, le rôle du récepteur PAR-2 dans la boucle d'auto-activation positive, et d'autre part, le rôle de la mitochondrie dans le remodelage musculaire lisse bronchique observé dans l'asthme. A partir de la culture primaire de CML bronchiques humaines, nous avons étudié dans un premier temps, le rôle du récepteur PAR-2 grâce à la technique d'interférence ARN dont les effets ont été observés en microspectrofluorimétrie. Dans un deuxième temps, l'implication de la biogenèse mitochondriale dans la prolifération des CML issuees de patients asthmatiques a été étudiée par différentes techniques moléculaires, cellulaires et fonctionnelles, et comparée à celle des CML issues de sujets témoins ou bronchopathes. Les résultats indiquent que le récepteur PAR-2 est impliqué dans la réponse calcique induite par la tryptase mastocytaire. En effet, son inhibition diminue la réponse calcique de la tryptase et du SLIGKV, ce qui n'est pas retrouvé avec d'autres agonistes non spécifiques du PAR-2. Par ailleurs, ce travail a également permis de montrer que les CML des patients asthmatiques sévères sont caractérisées par une augmentation de la biogenèse mitochondriale dont l'origine est une perturbation de l'homéostasie calcique et la conséquence un excès de prolifération cellulaire.
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Titre traduit
Role of bronchial smooth muscle cell in the pathophysiology of asthma
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Résumé
Inflammation of the bronchial wall and remodelling of bronchial smooth muscle cell (BSM) are two major characteristics of asthma. The aim of this thesis was to analyze the role of the BSM cell in asthma, and to precise, on the one hand, the role of the protease-activating réceptor 2 (PAR-2) in the positive loops existing between BSM and mast cell, and, on the other hand, the role of mitochondria in the BSL remodelling in asthma. Using human BSM cell primary culture, we firstly evaluated the role of PAR-2 by microspectrofluorimetry using RNA interference (RNAi). Secondly mitochondrial biogenesis on human BSM was studied using molecular, cellular and functional skills on BSM from asthmatics, COPD and control patients. This thesis, showed that (i) RNAi decreased both PAR-2 expression in terms of protein expression, and mRNA levels, and tryptase or SLIGKV-induced calcium rise, whereas neither trypsin nor caffeine response was altered ; (ii) asthmatic BSM was characterized by an altered calcium homeostasis which increased mitochondrial biogenesis that, in turn, enhances cell proliferation leading to airway remodeling.
