Thèse soutenue

Etude biochimique, structurale et physiopathologique de la lipase pancréatique humaine apparentée de type 2
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Auteur / Autrice : Cécilia Eydoux
Direction : Alain De Caro
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Nutrition et sécurité alimentaire
Date : Soutenance en 2007
Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté de médecine (1970-2011)

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Le pancréas humain synthétise trois ARNms différents codant pour la lipase pancréatique classique (HPL), la lipase pancréatique apparentée de type 1 (HPLRP1) et la lipase pancréatique apparentée de type 2 (HPLRP2). Ces lipases présentent une identité de séquence en acides aminés élevée (65-68%) et une organisation structurale identique ; mais leurs propriétés cinétiques sont différentes sur des substrats tels que les triglycérides, les phospholipides et les galactolipides. Un ELISA a été mis au point en utilisant des anticorps anti-peptides spécifiques de la HPLRP2 afin de quantifier la protéine dans le suc pancréatique d’individus sains ou atteints de pancréatite chronique calcifiante. Ces anticorps anti-peptides ont également été utilisés pour l’immuno-cytolocalisation de cette lipase le long du tractus digestif. La HPLRP2 est détectée dans les cellules principales de l’estomac, les cellules acineuses du pancréas et les cellules de Paneth intestinales, suggérant divers rôles : digestif et antimicrobien. La HPLRP2 recombinante a été produite à partir d’une souche déficiente en protéase A dans la levure Pichia pastoris. La lipase purifiée présente une masse moléculaire de 50 kDa et certaines de ces propriétés biochimiques ont été déterminées. Elle semble jouer le rôle de galactolipase dans la digestion des galactolipides in vivo. La présence des PLRP2 a été recherchée dans l’équipement enzymatique du pancréas de diverses espèces présentant des régimes alimentaires différents. L’obtention de la HPLRP2 non glycosylée par mutagenèse dirigée, a permis de cristalliser l’enzyme et de déterminer sa structure 3-D à une résolution de 2,8 Å dans la conformation ouverte en absence d’inhibiteur ou d’analogue de substrat.