FGF, FGF-2 et VEGF : régulation traductionnelle in vivo et nouvelle approche de la thérapie génique de l'ischémie des membres inférieurs

par Lionel Lourenço-Dias

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et moléculaire

Sous la direction de Anne-Catherine Prats.

Soutenue en 2006

à Toulouse 3 .

mots clés

• Thérapie génique
• Fgf
• Vegf
• Angiogenèse
• Ischémie
• Traduction
• Ires
• Ischémie -- Thérapie génique
• Angioplastie
• Membre inférieur
• Traduction génétique

Résumé

L'expression des facteurs angiogéniques majeurs ( FGF-1, FGF-2 et VEGF-A) est régulée au niveau traductionnel par des éléments structuraux de leur ARNm appelés IRES (Internal Ribosome Entry Sites). Ils permettent une initiation de la traduction indépendante du mécanisme classique dépendant de la coiffe. Cette thèse porte sur la régulation de l'activité des IRESs des ARNm du FGF-1, du FGF-2 et du VEGF-A. Nous avons utilisé un modèle de souris transgéniques et démontré ainsi que l'activité de ces IRES d'ARNm cellulaires est finement régulée in vivo dans des conditions physiopathologiques précises. Les IRES sont utilisés dans une perspective biotechnologique car ils permettent de co-exprimer plusieurs molécules à partir d'un seul ARNm. Notre objectif est de créer des vecteurs dits multicistroniques co-exprimant, grâce aux IRES, plusieurs facteurs pro-angiogéniques, en espérant obtenir un effet synergique activateur de l'angiogenèse réparatrice lors de l'ischémie du membre inférieur.

Titre traduit

FGF-1, FGF-2 and VEGF : in vivo translational regulation and new approach of lower limb ischemia gene therapy

Résumé

Gene expression of the major angiogenic factors (FGF-1, FGF-2 and VEGF-A) is controlled at the translational level by structural elements of their mRNA called IRES (Internal Ribosome Entry Sites). They allow an initiation of the translation independent of the traditional cap-dependent mechanism. This study concern the regulation of IRESs activities contained in FGF-1, FGF-2 and VEGF-A mRNA. We used a model of transgenic mice in and we showed that the activity of these IRESs of cellular mRNA is finely controlled in vivo under physiopathological conditions. IRESs were used in biotechnological applications. Indeed, they are translational enhancers and they make possible to co-express several molecules from one mRNA. Our objective was to create “multicistronic” vectors to co-express, thanks to IRESs, several pro-angiogenic factors, while hoping to obtain a synergistic effect in neo-vascularization of the lower limb ischemia.