Etude des bases moléculaires de la dynamique membranaire lors de la phagocytose

par Virginie Braun

Thèse de doctorat en Sciences biologiques

Sous la direction de Philippe Chavrier et de Florence Niedergang.

Soutenue en 2006

à Paris 11 , en partenariat avec Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne) (autre partenaire) .

mots clés

• Macrophages
• Snare
• Exocytose

Résumé

La phagocytose est un mécanisme d'internalisation dépendant de la polymérisation d'actine et d'un apport de membranes au site de phagocytose provenant des compartiments intracellulaires. Les endosomes de recyclage et le réticulum endoplasmique participent à cette exocytose. Nous avons mis en évidence un recrutement des endosomes tardifs au niveau du phagosome en formation. La fusion de ce compartiment avec la membrane du phagosome en formation. La fusion de ce compartiment avec la membrane du phagosome est sous le contôle de la protéine SNARE TI-VAMP/VAMP7. Cet apport de membranes à partir des endosomes tardifs est nécessaire à la phagocytose et participe à l'extension des pseudopodes. De plus, nous avons cherché à caractériser la machinerie moléculaire jouant un rôle dans la formation des vésicules rercutées au site de phagocytose à partir des différents compartiments intracellulaires. Nous avons montré que parmi les protéines de manteau, qui jouent un rôle dans la formation des vésicules et l'adressage de molécules vers les compartiments cellulaires, le complexe AP-1 est présent au site de phagocytose et est nécessaire à une phagocytose optimale. En conclusion, mon travail a permis de mieux caractériser les acteurs protéiques qui jouent un rôle crucial dans les réorganisations dynamiques de la membrane plasmique, nécessaires à la phagocytose.

Titre traduit

Molecular mechanisms of membrane trafficking during phagocytosis

Résumé

Phagocytosis is a mechanism of internalization dependet on actin polymerization and on a delivery of membranes from intracellular compartments to the site of phagocytosis. Recycling endosomes and the endoplasmic reticulum are involved in this exocytosis process. I have shown that late endosomes are recruited to the site of phagocytosis and that this exocytosis is necessary for phagocytosis. The fusion between late endosomes and the membrane of the forming phagosome is controlled by the SNARE protein TI-VAMP/VAMP7. Then I have focused on the molecular machinery involved in the formation and the targeting of vesicles from intracellular compartments to the site of phagocytosis. I have shown that the clathrin-adaptor AP-1, which participate in cargo selectivity and transport vesicle formation, is present at the site of phagocytosis and necessary for phagocytosis. These results led us to better understand the molecular machinery involved in dynamic reorganizations of the plasma membrane that are necessary for optimal phagocytosis.