Rôle de la sérine/thréonine phosphatase Stp dans le processus infectieux de Listeria monocytogenes

Role of the serine/threonine phosphatase Stp in the infectious process of Listeria monocytogenes

• Auteur / Autrice : Cristel Archambaud
• Direction : Pascale Cossart
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Listeria monocytogenes

Virulence

Superoxyde dismutase

Mots clés libres

Sérine-thréonine phosphatase

Facteur d'élongation de la traduction

Résumé

Listeria monocytogenes est une bactérie pathogène qui est capable de survivre et croître dans les conditions extrêmes et multiples qu'elle rencontre dans l'environnement et à l'intérieur de l'hôte. La capacité d'adaptation de L. Monocytogenes joue un rôle central dans la survie et la virulence de cette bactérie. La phosphorylation réversible des protéines est l'un des mécanismes majeurs permettant la transduction des signaux externes. Nous avons entrepris de caractériser Stp. La première sérine/thréonine phosphatase de L. Monocytogenes. En utilisant une combinaison d'approches génétique, biochimique et phosphoprotéomique. Nous avons démontré que le gène stp code pour une Ser/Thr phosphatase dépendante du manganèse similaire aux protéines eucarvotes de la famille PPM. Afin d'identifier les protéines déphosphorylées par Stp. Nous avons réalisé une étude phosphoprotéomique couplée à une analyse de spectrométrie de masse. Nous avons identifié le facteur d'élongation de la traduction EF-Tu et la superoxyde dismutase dépendante du manganèse (MnSOD) comme cibles de Stp. Nous avons démontré que Stp et MnSOD jouent un rôle dans la virulence de L. Monocytogenes. Ces travaux ont permis de caractériser Stp comme la première Ser/Thr phosphatase bactérienne capable de déphosphoryler EF-Tu et d'identifier un nouveau mode de régulation de la MnSOD de L. Monocytogenes.

Listeria monocytogenes is a bacterial pathogen which is able to survive and grow in the harsh and multiple conditions encountered outside as well as inside the host. The capacity of adaptation of L monocytogenes plays a central role in the survival and the virulence of the bacterium. Reversible phosphorylation of proteins is a major mechanism allowing transduction of external signals. We characterized the first serine/threonine phosphatase of L. Monocytogenes. Stp. By using a combination of genetic. Biochemical and phosphoproteomic approaches. We showed that the stp gene encodes a Mn-dependent Ser/Thr phosobatase similar to those of the eukaryotic PPM family. In order to identify the proteins that were dephosphorylated by Stp. We used a phosphoproteomic approach coupled to mass spectrometry. We identified the translation elongation factor EF-Tu and the Mn-dependent superoxide dismutase (MnSQD) as targets of Stp. We demonstrated that Stp and MnSOD play a role in the virulence of L monocytogenes. This work led us to the characterization of Stp as the first bacterial Ser/Thr phosphatase that can dephosphorylate EF-Tu and to the identification of a new mode of regulation of the MnSOD in L.