Les phospholipases A2 sécrétées et leurs récepteurs : propriétés moléculaires et implication dans le cancer colorectal chez la souris

Secreted phospholipases A2 and their receptors : molecular properties and implication in mouse colorectal cancer

• Auteur / Autrice : Fanny Surrel
• Direction : Gérard Lambeau
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Nice
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Sophia Antipolis, Alpes-Maritimes)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Lipides -- Métabolisme

Cellules -- Prolifération

Cancer

Côlon

Eicosatétraénoïque, Acide

Phospholipases A

Résumé

Les phospholipases A2 sécrétées (sPLA2) de mammifères constituent une famille de 11 enzymes qui hydrolysent les phospholipides pour libérer un acide gras et un lysophospholipide. Cette réaction est à la base de la production de nombreux médiateurs lipidiques comme les icosanoïdes et les lysophospholipides bioactifs. Certaines sPLA2 sont aussi capables d'interagir spécifiquement avec des protéines solubles ou membranaires comme le récepteur M. La première partie de ce travail a permis d'élargir les connaissances sur les propriétés moléculaires des sPLA2. Tout d'abord, nous avons tenté de caractériser la structure native de la sPLA2-IIF, qui pourrait être la seule sPLA2 dimérique. L'analyse des propriétés de liaison de toutes les sPLA2 de souris sur le récepteur M murin montre que 5 sPLA2 sont des ligands de haute affinité pour ce récepteur. De plus, nous avons analysé l'expression tissulaire au niveau ARN et protéine des différentes sPLA2 de souris. Dans un deuxième temps, nous avons évalué l'implication de la sPLA2-X dans le cancer colorectal. L'approche in vitro sur des cellules tumorales de côlon de souris indique que la sPLA2-X active la prolifération cellulaire, laquelle est dépendante de la production de multiples médiateurs lipidiques. La sPLA2-X est également capable d'induire différents gènes impliqués dans le développement tumoral, notamment COX-2. L'approche in vivo a visé à étudier l'effet de la délétion du gène sPLA2-X dans le modèle de cancer colorectal de souris ApcD14 développant spontanément des polypes dans l'intestin et le côlon. Cette délétion ne semble pas entraîner de variation du nombre de tumeurs, mais pourrait diminuer l'expression de COX-2.

Mammalian secreted phospholipases A2 (sPLA2) form a family of 11 enzymes that hydrolyse phospholipids to produce fatty acids and lysophospholipids. This reaction controls the production of numerous lipid mediators including eicosanoids and bioactive lysophospholipids. Some sPLA2s are also able to specifically bind to various proteins including the M-type receptor. In a first part, we have tried to determine the native structure of mouse sPLA2-IIF, that is predicted to be a dimeric sPLA2. Analysis of the binding properties of mouse sPLA2s on the mouse M-type receptor shows that 5 sPLA2s are high affinity ligands for the receptor, including sPLA2-X and –IIF. Tissue distribution analysis of the whole set of mouse sPLA2s at both the RNA and protein levels shows that sPLA2-X is mostly expressed in mouse colon. In a second part, we have determined the implication of sPLA2-X in mouse colorectal cancer. In vitro, we have shown that sPLA2-X increases the proliferation of mouse colon cancer cells. This proliferative activity is dependent on catalytic activity and ability of sPLA2﷓X to produce different lipid mediators. SPLA2-X is also able to induce several genes implicated in tumorigenesis, including COX-2. In vivo, we have analysed the effect of sPLA2-X gene invalidation in the novel mouse model of colorectal cancer ApcD14 that spontaneously develops polyps in the small intestine and the colon. This deletion does not seem to influence significantly the number of polyps, but would decrease COX-2 expression.