Études des interactions intra et intermoléculaires de BmrA : un transporteur ABC de multiples drogues chez Bacillus subtilis

• Auteur / Autrice : Minh Trang Do Cao
• Direction : Attilio Di Pietro, Jean-Michel Jault
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Lyon 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Résistance aux médicaments

Résonance paramagnétique électronique

Protéines membranaires

Transporteurs ABC

Résumé

La protéine BmrA ("Bacillus multidrug resistance ATP") est un transporteur ABC ("ATP-Finding Cassette") identifié au sein de notre laboratoire. Nous avons étudié la conformation adoptée par la protéine entière en analysant la structure secondaire d'une région charnière par Résonance Paramagnétique Electronique, ce qui nous a permis de valider un modèle structural, où la protéine adopte préférentiellement une conformation compacte. Cette approche nous a permis de mettre en évidence une région impliquée dans le transport des drogues. Nous avons également étudié l'organisation quaternaire des domaines de fixation des nucléotides. Après introduction de cystéines par mutagénèse dirigée, nous avons voulu déterminer une interface préférentielle d'interaction en observant la formation de pontage intermoléculaire. Nos résultats suggèrent l'existence d'une grande flexibilité des domaines, qui faciliterait la fixation des nucléotides et favoriserait ainsi le mécanisme d'hydrolyse del'ATP