Thèse soutenue

Suivi isotopique par RMN et GC-MS de l'assimilation de l'azote chez les plantules de colza : Aspects de régulation de la nitrate réductase
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Auteur / Autrice : Nassima Houyou
Direction : Corinne Pau-RoblotAlbrecht Roscher
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences. Biochimie métabolique
Date : Soutenance en 2006
Etablissement(s) : Amiens

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Quand l'ammonium constitue la seule source d'azote disponible pour des plantules de colza (Brassica napus), l'activité de la nitrate réductase (NR) double dans les cotylédons et l’hypocotyle (Leleu, 2000) au lieu de baisser. Nous avons étudié les voies métaboliques concernées pour élucider cette régulation inhabituelle de la NR. Ainsi, une mise au point du suivi isotopique 15N de l’assimilation du l’azote par RMN in vivo, RMN in vitro et par GC-MS nous a permis d'étudier la réponse métabolique de la nitrate réductase des parties aériennes de colza en fonction du type de régime azoté employé, ammonium (NH4Cl) ou nitrate (KNO3), de la présence ou de l’absence de lumière ainsi que de l’utilisation d'inhibiteurs du cycle GS/GOGAT. Les résultats obtenus indiquent une stimulation des flux d’assimilation du 15NO3 - après une culture avec de l’ammonium par rapport à une culture avec du nitrate. Cette stimulation est liée à la glutamine synthétisée en grandes quantités en condition ammonium par le cycle GS/GOGAT. Des expériences d’inhibition de la GS par la MSX et de la GOGAT par l’azasérine ont révélé un effet du taux de glutamine intracellulaire sur l’activité de la NR in vivo ce qui est en accord avec les mesures in vitro dans les mêmes conditions physiologiques (Leleu, 2000). Finalement, l’effet activateur de la lumière sur l’assimilation du 15NO3 - a aussi été observé dans les deux conditions KNO3 et NH4Cl. Cette activation par la lumière d’un facteur 2 semble indépendante de celle de l’ammonium et donc de l’effet de la glutamine reflétant ainsi deux mécanismes différents de régulation de la NR.