Thèse de doctorat en Biologie cellulaire
Sous la direction de Franck Boué.
Soutenue en 2005
à Nancy 1 , en partenariat avec Université de Nancy I. Faculté de médecine (autre partenaire) .
Le but de ce travail était tout d'abord, la mise au point d'outils immunologiques permettant l'analyse de la réponse immune humorale et cellulaire chez le renard (Vulpes vulpes). Après avoir sélectionné des anticorps reconnaissant les différentes classes d'immunoglobuline de renard, le modèle antigénique ovalbumine et choléra toxine B a été utilisé pour mettre au point les techniques ELISA et ELISPOT. Quatre cytokines vulpines Il2, Il6, Il10 et INFy ont été clonées et séquencées, et une technique d'analyse de leur expression par RT-PCR quantitative, après re-stimulation antigénique in vitro de PBMCs vulpins a été mise au point. Par la suite, différents vaccins ADN utilisant le vecteur vaccinaI commercial pVAX1 et les antigènes spermatiques spécifiques du testicule fSP13 et fSP8 identifiés au laboratoire ont été construits. La fonctionnalité de celles-ci à tout d'abord été testée in vitro pour l'expression de fSP 13 et fSP8 après transfection de cellules MDCK.
Development of an immunocontraceptive vaccine : development of immunological tests for the vulpine model and of DNA vaccines coding for the sperm antigens fSP8 and fSP13
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