Etude de deux endo β-(1,4) xylanases de famille 11 provenant des champignons Penicillium funiculosum et Botrytis cinerea – Interaction avec des inhibiteurs protéiques du blé, XIP-I, TAXI-I et II

Studies of two family 11 endo-beta-(1,4) xylanase from fungi Penicillium funiculosum and Botrytis cinerea- Interaction studies with proteinaceous inhibitors from wheat

• Auteur / Autrice : Alexandre Brutus
• Direction : Thierry Giardina
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Nutrition, aspects cellulaires et moléculaires
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Hydrolases

Botrytis cinerea

Penicillium

Résumé

Nous avons exprimé dans différents systèmes hétérologues l'ADNc de la xylanase (XYNB) du champignon filamenteux Penicillium funiculosum ainsi que celle du phytopathogène Botrytis cinerea (XynBc) appartenant toutes deux à la famille des GH11 des glycosylhydrolases. Les propriétés physico-chimiques des enzymes recombinantes ont été déterminées. XYNB et XynBc montrent les mêmes spectres d'inhibitions en présence d'inhibiteurs protéiques probablement impliqués dans des mécanismes de défenses des plantes et issus du blé ; les activités sont fortement inhibées par XIP-I et TAXI-I tandis que TAXI-II n'a aucun effet. Des essais de RT-PCR semi-quantitatives ont montré la présence des ARNm au cours des 72 premières heures de l'infection de feuilles de tabacs par B. Cinerea.

The phytopathogen fungus Botrytis cinerea and the filamentous fungus Penicillium funiculosum produce various glycosidases with xylanase activity. In the present study, we report the heterologous expression, purification and characterization of two family 11 xylanase produced by these fungi. These enzymes present similar activities on different substrates and identical suceptibilities to different proteinaceous inhibitors from wheat. These xylanases were sensitive to XIP-I, TAXI-I but not to TAXI-II. The inhibition was competitive and the inhibition constant were in the nanomolar range indicting a great affinity between these xylanases and the wheat inhibitors. Moreover, we have shown that the presence of glycosylation or of a carbohydrate binding module in the xylanase, did not affect the interaction of the enzyme with the inhibitor.