Etude de la différenciation des cellules musculaires lisses in vitro : rôle du facteur de transcription NFAT2 et de l'organisation tridimensionnelle de la fibre élastique

par Daniel Larrieu

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et médicales. Biologie - Santé

Sous la direction de Jean Marie Daniel Lamazière.

Soutenue en 2004

à Bordeaux 2 .

mots clés

• Athérosclérose -- Physiopathologie
• Myocytes
• Muscle lisse vasculaire
• Tissu élastique (histologie)
• Différenciation cellulaire
• Monoamine oxydase -- Effets physiologiques

Résumé

Les cellules musculaires lisses (CML) sont capables de moduler leur phénotype. Cette modulation phénotypique, associée à des propriétés de prolifération et de migration, est impliquée dans des processus physiopathologiques, tels que l'athérosclérose et l'hypertension. Les facteurs induisant ces variations phénotypiques sont mal connus. Dans ce manuscrit, j'ai exploré, l'étude, in vitro, du rôle du facteur de transcription NFAT2 dans le processus de différenciation des CML. L'état de différentiation des CML a été suivi à l'aide d'un marqueur de différenciation, sm-MHC, et d'un marqueur de dédifférenciation, 2PIA2. J'ai mis en évidence que la translocation nucléaire du NFAT2 est primordiale au maintien et à l'acquisition de l'état différencié des CML. De plus, j'ai montré que l'anticorps 2P1A2, reconnaissait un epitope conformationnel membranaire de l'isoforme non-musculaire de la myosine IIA qui possède une distribution près du noyau et orientée vers les pseudopodes de CML dédifférenciées. La différenciation est fonction de la fibre élastique. La fibre élastique est un des composants majeurs de la paroi artérielle. Les amines oxydases telles que la lysyloxydase sont importantes dans la formation de la trame élastique. Nous avons mis en évidence une relation entre la diminution d'une autre amine oxydase, la semi-carbazide sensitive amine oxydase (SSAO), l'amincissement de la fibre élastique et la dédifférenciation des CML dans la survenue des anévrismes aortiques humains.

Titre traduit

SMC differentiation study in vito : role of NFAT2 transcription factor and elastic fibre tridimensional organisation

Résumé

Smooth muscle cells (SMC) are capable of modulating their phenotype. This phenotypic modulation, associated with proliferation and migration properties, is implicated in physiopathological processes like arteriosclerosis and hypertension. Factors wich induce these phenotypic variations are poorly known. In this manuscript, I have explored, the study, in vitro, of the NFAT2 transcription factor role in SMC differentiation process. SMC differentiation state have been followed with the help of a differentiation marker, sm-MHC, and a dedifferentiation marker, 2P1A2. I emphasized that NFAT2 nuclear translocation is essential to the maintain and the acquisition of differentiated SMC state. Moreover, I showed that 2P1A2, recognized a membrane conformation epitope of the non-muscle myosin II A which have a distribution near the nucleus and oriented towards pseudopode in dedifferentiated SMC. SMC differentiation state is function of elastic fibre. Elastic fibres is one of major components of the arterial wall. Amine oxydases like lysil oxidase are important in the formation of elastic scaffold. We emphasized a relation between the decrease of an other amine oxydase, the semi-carbazide sensitive amine oxydase (SSAO), the decrease of elastic lamellar thickness and the dedifferentiation of SMC in the apparition of human aortic anevrysm.