Etude de l'épimérisation de sels biliaires 7α-hydroxylés par Clostridium absonum ATCC 27 555

par Magda Warchol

Thèse de doctorat en Biologie structurale, moléculaire et cellulaire

Sous la direction de François Schneider.

Soutenue en 2003

à Nancy 1 , en partenariat avec Université Henri Poincaré Nancy 1. Faculté des sciences et techniques (autre partenaire) .

mots clés

• Clostridium sardiniense -- Métabolisme
• Hydroxystéroïdes déshydrogénases
• Sels biliaires
• Épimérisation

Résumé

Clostridium absonum ATCC 27555 synthétise trois hydroxystéroi͏̈de déshydrogénases inductibles réalisant l'épimérisation de sels biliaires 7a-hydroxylés. Dans des cultures en fermenteur dans un milieu complexe, l'induction de ces enzymes par l'acide chénodésoxycholique était maximale lorsque ce substrat était ajouté pendant la croissance, dans les conditions d'un effet limitant du glucose et du pH sur la production de biomasse et des acides organiques. Dans des cultures continues en milieu chimiquement défini, en présence de l'acide chénodésoxycholique les flux carbonés étaient réorientés en favorisant la production d'acétate et d'énergie, aux dépens de la réoxydation des facteurs nucléotidiques, pour assurer l'épimérisation de cet acide. Certaines propriétés des hydroxystéroi͏̈de déshydrogénases purifiées ont été étudiées. Ces résultats soutiennent l'hypothèse que l'épimérisation de l'acide chénodésoxycholique puisse représenter un processus de détoxification.

Résumé

Clostridium absonum ATCC 27555 synthesize three inducible hydroxysteroid dehydrogenases which ensure epimerization of 7a-hydroxylated bile salts. In cultures in fermentor in complex medium, induction of these enzymes by chenodeoxycholate was maximum when this substrate was added during growth, in condition of a limiting effect of glucose and pH on the production of biomass and organic acids. In continuous cultures in chemically defined medium, in the presence of chenodeoxycholate the carbon flows were reoriented favoring the production of acetate and energy, at the expense of the reoxydation of nucleotidic cofactors, so as to ensure epimerization of this acid. Some properties of the purified hydroxysteroid dehydrogenases was studied. These results support the hypothesis that epimerization of chenodeoxycholate may represent a detoxification process.