Etude de la signalisation intracellulaire associée au recepteur de la prolactine dans une lignée d'astrocytes tumoraux humains (cellules U87-MG)

par Thomas Ducret

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et médicales. Neurosciences et pharmacologie

Sous la direction de Pierre Vacher.

Soutenue en 2003

à Bordeaux 2 .

mots clés

• Prolactine -- Mécanisme d'action
• Prolactine -- Effets physiologiques
• Canaux calciques
• Prolactine -- Récepteurs
• Cellules -- Prolifération
• Calcium -- Métabolisme
• Patch-clamp, Technique du
• Microscopie confocale

Résumé

En dépit de la multiplicité des effets physiologiques de la prolactine (PRL) et de ses tissus cibles, les mécanismes intracellulaires à l'origine de ses effets sont méconnus. Nous avons donc recherché les effets de la PRL sur les conductances ioniques et la [Ca2+]i, ainsi que les voies de signalisation impliquées, sur la lignée U87-MG d'astrocytes tumoraux humains. En utilisant la microspectrofluorimétrie, la microscopie confocale de fluorescence et l'electrophysiologie (patch-clamp), nous montrons que la PRL induit l'activation d'une conductance K+ Ca2+ -dépendante, associée à une entrée de Ca2+ via des canaux Ca2+ voltage-indépendants activés par des seconds messagers. Nous mopntrons également que la PRL exerce des effets prolifératif et anti-apoptotique sur les cellules U87-MG. L'établissement du lien entre ces différents phénomènes devrait permettre de mieux comprendre le mécanisme d'action de la PRL en général ainsi que son éventuelle implication dans la tumorisation des cellules.

Titre traduit

Study of the prolactin receptor intracellular signalisation in the human malignant astrocytoma cell line U87-MG

Résumé

In spite of the multiplicity of prolactin (PRL) physiological effects and its target tissues, the intracellular mechanisms mediating these effects are not clearly understood. So we have studied the effects of PRL on ionic conductances and [Ca2+]i, as well as the intracellular pathways, in the human malignant astrocytoma cell line U87-MG. Using microspectrofluorimetry, fluorescence confocal microscopy and electrophysiology (patch-clamp), we show that PRL induces the activation of a Ca2+ -dependant K+ conductance, associated with a Ca2+ entry through second messenger-operated and voltage-independent Ca2+ channels. We also show that PRL exerts proliferative and anti-apoptotique effects in the U87-MG cells. The establishment of the link between these different phenomenons should allow a better understanding of PRL action mechanisms, but also its possible implication in cell tumorisation.