Modulation de l'activité de la thrombine

• Auteur / Autrice : Pierre-Emmanuel Marque
• Direction : Bernard Le Bonniec
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie. Hémostase
• Date : Soutenance en 2002
• Etablissement(s) : Paris 5
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale du Médicament (....-2009Paris)
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (....-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Anticoagulants

Protéines recombinées

Protéine C

Thrombomoduline

Thrombine

Résumé

La coagulation du sang est déclenchée par une activation enzymatique en cascade de zymogènes initialement inactifs. Cette cascade, bien que de nature explosive, est sélective et auto-contrôlée. C'est la dernière enzyme générée (la thrombine) qui la module directement et indirectement. L'activité de la thrombine est elle même régulée par trois mécanismes : 1) un auto-contrôle de sa génération, 2) une modulation par la thrombomoduline et 3) sa neutralisation par l'antithrombine. Ces deux derniers mécanismes ont été abordés au cours de cette thèse, plus particulièrement celui de la voie de la protéine C, qui est le seul système anticoagulant inductible donc auto-régulé. La neutralisation directe de la thrombine par son principal inhibiteur plasmatique a été étudiée à l'aide d'un anticorps monoclonal qui permet de distinguer la conformation de l'antithrombine complexée de tous les autres conformères de cette serpine. Cette étude a fourni des informations incontournables sur la nature de l'interaction enzyme-serpine. L'étude sur la "thrombomodulation" a commencé par une cartographie de la spécificité des sous-sites catalytiques de la thrombine à l'aide de substrats à fluorescence réprimée. . .

Blood coagulation results in sequential activation of plasma proenzyme to their enzyme form. This burst of activation is very selective and auto-regulated. It is the last enzyme (thrombin) who controls directely and indirectely this cascade. Thrombin activity is regulated through three mechanisms 1) an auto-control of its generation, 2) modulation by thrombomodulin and 3) neutralization by antithrombin. The last two mechanisms were discussed in this thesis, especially Protein C activation which is the only inductible anticoagulant system. Direct neutralization of thrombin by antithrombin was investigated through the characterization of a monoclonal antibody that selectively recognizes complexed antithrombin. This antibody reacts with none of the monomeric conformers of antithrombin. These observations limit drastically the possible locations of the defeated protease within the complex. . .