Purification et caractérisation d'une lipase extracellulaire issue d'une souche fongique isolée à partir du fruit de palme : application à la synthèse d'esters aromatiques

Purification, characterisation of an extracellular lipase isolated from palm fruit : application on synthesis of aromatic esters

• Auteur / Autrice : Houria Abbas
• Direction : Louis-Claude Comeau
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie de la nutrition. Aspects moléculaires et cellulaires
• Date : Soutenance en 2002
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Estérification

Purification

Lipases

Mucoracées

Huile de palme

Résumé

Au cours des travaux visant à l'isolement des lipases fongiques responsables de l'acidification de l'huile de palme, nous avons mis en évidence une novelle souche fongique, Mucor sp. Les principaux facteurs intervenant dans la production de la lipase ainsi que leur interaction ont été déterminés et une activité lipolytique de 57à 62 U/ ml a été obtenue après 6 jours de culture. La lipase extracellulaire a été purifiée 1050 fois avec une activité spécifique de 6600 U/mg. La caractérisation structurale de cette enzyme montre qu'il s'agit d'une nouvelle lipase. La capacité de la lipase immobilisée à catalyser la synthèse d'arômes a été étudiée dans un milieu organique à 35ʿC. Des rendements supérieurs à 90% ont été obtenus dans les plupart des cas. Des conversions importantes et rapides de 92% et 98% sont respectivement observées pour le caproate de méthyle et le caproate d'éthyle après 4 h de réaction. Des rendements de 95%, 100% et 93% ont été respectivement obtenus pour le butyrate et le caproate de butyle et le caproate d'allyle après 24 h de réaction.

During our screening of lipolytic fungus which may play a role in the acidification of palm oil, we have recently isolated a Mucor sp strain. Culture conditions were optimized and the highest lipase production amounting to 57-62 U/ml was achieved after 6 days of cultivation. The extracellular lipase was purified 1050 fold to a final specific activity of 6600 UI/mg. The structural characterization of the lipase did not showed similarity with the other lipases suggesting that the enzyme may be a new lipase. The ability of Mucor sp lipase immobilized on Amberlite IRC 50 to catalyze the synthesis of flavour esters was investigated in organic media at 35ʿC. Most of the esters were synthesized in good yield (>90%). Rapid and higher conversions of 92% and 98% were observed for methyl caproate and ethyl caproate respectively after 4 h reaction, and a yields of 95%, 100%, 93% were obtained for butyl butyrate, butyl caproate and allyl caproate respectively after 24 h reaction.