Caractérisation moléculaire des facteurs de virulence de Rhodococcus equi

par Stéphanie Benoît

Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie

Sous la direction de Axel Hartke.

Soutenue en 2001

à Caen .

mots clés

• Rhodococcus equi
• Bactéries -- Effets du stress
• Virulence (microbiologie)
• Plasmides
• Stress oxydatif

Résumé

R. Equi est un pathogène intracellulaire responsable de bronchopneumonies chez les jeunes poulains. Cette bactérie possède un plasmide de virulence indispensable au développement de la pathogenèse. Pour les besoins de l'étude, un mutant curé du plasmide de virulence a été construit. La réponse de la souche sauvage et du mutant face à un stress acide et un stress oxydatif au peroxyde d'hydrogène a été analysé. Les deux souches présentent des niveaux de résistance particulièrement élevés face à ces deux stress, suggérant le présence de mécanismes de défense constitutifs. En plus de ces mécanismes, R. Equi est capable d'établir une réponse adaptative au pH acide. Cette acidotolérance, ainsi que l'exposition de R. Equi à des concentrations sublétales en H2O2 induisent peu de bouleversements de la synthèse protéique. Néanmoins, certains des polypeptides surexprimés, d'origines chromosomique et plasmidique, peuvent jouer un rôle dans le développement de la pathogénie ou encore posséder des propriétés antigéniques intéressantes pour l'immunoprophylaxie. Parmi les protéines de stress identifiées, on peut nommer les protéines VapA, VapD et VapG appartenant à la famille des protéines Vap. Ces trois protéines, codées par des gènes portés par le plasmide de virulence et potentiellement exprimées à l'intérieur des phagosomes, pourraient être les principaux acteurs de la multiplication intracellulaire de la bactérie. De plus, ces gènes vap possèdent des séquences leader inhabituellement longues, identiques entre elles à plus de 60%, qui pourraient être impliquées dans la régulation des gènes stress-inductibles chez R. Equi. Deux autres protéines de stress ont également été identifiées : KatE et CatB, deux hydroperoxydases codées par des gènes chromosomiques qui sont en cours de caractérisation.

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