Analyse moleculaire et genetique de glide/gcm, un gene necessaire et suffisant a induire le destin glial

• Auteur / Autrice : SANDRO SORRENTINO
• Direction : Angela Giangrande
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Strasbourg 1

Résumé

Nous avons utilise la drosophile comme systeme modele pour l'etude de la gliogenese. Il a ete recemment identifie et clone glial cell deficient/glial cell missing (glide/gcm), un gene necessaire et suffisant pour induire le destin glial dans le systeme nerveux. Comme plusieurs donnees suggerent que la gliogenese depend de la regulation spatiale et temporelle de glide/gcm, nous avons entrepris d'analyser le promoteur de glide/gcm par sauvetage du phenotype mutant apres transformation de la lignee germinale. Dans ce but, j'ai produit differentes constructions contenant la region codante et une partie de plus en plus importante du promoteur ; toutes les constructions ont alors ete utilise pour obtenir plusieurs lignees transgeniques. Les lignees transgeniques ont alors ete croisees avec un mutant nul pour glide/gcm. Aucune lignee n'a montre un sauvetage complet du phenotype. En utilisant des anticorps specifiques, j'ai analyse le phenotype des embryons homozygotes pour les transgenes. Chaque construction a ete capable de sauver uniquement certains lignages gliaux et de sauver partiellement les defauts du mutant glide/gcm homozygote. Le sauvetage obtenu est proportionnel a la longueur du fragment de promoteur contenu dans le transgene. Ainsi le transgene portant le promoteur le plus long, sauve le plus grand nombre de lignages gliaux, et possede egalement le plus haut degre de sauvetage des defauts neuronaux et auxonaux. Ceci signifie que les elements regulateurs responsables de l'expression de glide/gcm dans les differents lignages gliaux, sont localises dans differentes regions du promoteur. Les embryons portant les differents transgenes ont ete caracterises avec des marqueurs specifiques de chaque lignage glial. Ceci a permis d'identifier les cellules gliales sauvees par les differents transgenes et ainsi de determiner le fragment responsable du sauvetage de chaque lignage glial.