Synthese de nouveaux haptenes et generation d'anticorps pour la resolution cinetique dynamique des 2-phenyloxazolin-5-ones par voie abzymatique

• Auteur / Autrice : MURIELLE BUJARD BLANC
• Direction : Charles Mioskowski
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Psychologie
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Strasbourg 1

Résumé

Afin de valider le concept de resolution cinetique dynamique par voie abzymatique, nous nous sommes proposes de generer des anticorps capables de catalyser l'ouverture enantioselective des 2-phenyl-oxazolin-5-ones. Pour produire ces abzymes, nous avons prepare deux haptenes mimant l'etat de transition de cette reaction, a savoir un acide phosphinique et un ammonium quaternaire. L'etape cle de la synthese de chacun de ces haptenes repose sur une reaction de cyclisation par metathese. Cette reaction a alors ete developpee pour mettre au point une nouvelle methode de preparation de certains heterocycles phoshores, azotes ou oxygenes. Des phosphinates cycliques polyfonctionnalises a cinq, six ou sept chainons, de meme que divers ,-dihydropyrroles ou dihydrofurane -aryles ont ainsi ete synthetises selon cette strategie. L'immunisation realisee a partir de l'haptene phosphore nous a permis d'obtenir cinq anticorps monoclonaux, selectionnes vis-a-vis de leur affinite pour cet haptene. A ce stade, et malgre de nombreux essais, nous n'avons pas reussi a mettre au point une methode efficace de detection de l'activite catalytique des anticorps presents dans les surnageants de culture. Cet echec est a mettre au compte de l'instabilite des 2-phenyloxazolin-5-ones en milieu aqueux d'une part, et de la presence probable d'enzymes a activite esterase d'autre part. Les cinq anticorps monoclonaux obtenus ont finalement ete purifies et devraient etre testes prochainement pour leurs proprietes catalytiques. Quant a l'haptene azote, il devrait donner lieu a une nouvelle serie d'immunisations.