Des acides amines aux proteines : une comprehension des processus en phase gazeuse sous electronebulisation et application aux etudes structurales de toxines peptidiques

par Carlos Afonso

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de Jean-Claude Tabet.

Soutenue en 2000

à Paris 6 .

mots clés

Résumé

Les progres recents dans le domaine des biotechnologies permettent aujourd'hui la production a grande echelle d'agents biologiques comme les toxines peptidiques. Dans un but d'expertise et de surveillance, la detection de ces agents est devenue un enjeu d'importance. La spectrometrie de masse couplee a la chromatographie liquide est la methode de choix pour la detection des ces composes non-volatils. Aujourd'hui ce couplage est assure la plupart du temps au moyen d'une source electrospray. La comprehension des processus de desorption mis en jeu lors de l'analyse de biomolecules (souvent multichargees) sous electronebulisation est alors particulierement importante. Dans ce but, les associations non-covalentes, entre des petits systemes comme les acides amines ou de plus gros systemes comme la myoglobine, ont ete etudiees tantot sous forme solvatees dans la zone de desolvatation de la source, tantot dans l'analyseur (piege quadripolaire). S'il est difficile d'obtenir des informations directes sur ce qui se passe dans la source, l'evolution des etats de charge sur les spectres de masse constitue un moyen indirect pour visualiser les consequences de la solvatation. L'analyseur de masse utilise impose une fenetre de temps qui peut modifier l'allure des spectres de masses. Pour cette raison une etude de l'influence de l'analyseur sur la temperature effective des ions a ete entreprise.

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