Contribution a l'etude des hydroxylations microbiologiques : modulation par mutagenese ou action des inhibiteurs de cytochromes p450

• Auteur / Autrice : VALERIA DE OLIVEIRA
• Direction : Robert Azerad
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Paris 5

Résumé

Au cours de ce travail nous nous sommes interesses aux hydroxylations par voie microbiologique utilisant des champignons filamenteux et plus particulierement cunninghamella echinulata atcc 9244. La regio et la stereoselectivite de ces hydroxylations sur deux substrats modeles deja connus, la trimegestone et le biphenyle, et sur un substrat nouveau, un dicetal de la cis-bicyclo3. 3. 0octane-3,7-dione, ont ete examinees. Divers mutants de cunninghamella echinulata atcc 9244 ont ete prepares, par mutagenese de spores ou de protoplastes uninuclees et leur profil de metabolisation pour les trois substrats choisis a ete compare a celui de la souche parentale, en vue de mettre en evidence la presence d'hydroxylases (cytochromes p450) distinctes. Nous avons egalement etudie la biotransformation de ces trois substrats en presence de divers inhibiteurs selectives dans la formation de certains metabolites hydroxyles. Les resultats obtenus par les deux methodes plaident en faveur de l'implication de cytochromes p450 specifiques dans la catalyse de reactions etudiees : hydroxylations de carbones non actives ou hydroxylations aromatiques.