Micrométastases dans le cancer du sein : de l'image scintigraphique à la détection moléculaire

par Ramiro Cevallos

Thèse de doctorat en Génie enzymatique, bioconversion et microbiologie

Sous la direction de Alberto Roseto.

Soutenue en 1999

à Compiègne .

mots clés

• Exploration radioisotopique
• Cellule tumorale
• Cancer du sein
• Métastases
• Scintigraphie osseuse
• Apoptose
• Glande mammaire
• PCR (génétique)
• Transcription inverse
• Séparation magnétique

Résumé

Notre intention avec ce travail est de rapprocher la recherche fondamentale et les applications cliniques en essayant de mieux utiliser les connaissances fondamentales permettant d'en faire bénéficier le plus tôt possible les patientes cancéreuses. La détection des cellules tumorales circulantes (CTC) associant des méthodes d'immunosélection magnétique et la RT-PCR permettre d'accroitre la possibilité de détection précoce des métastases du cancer du sein. Il s'agit de méthodes beaucoup plus sensibles que la scintigraphie osseuse pour la détection de métastases. Il est nécessaire actuellement d'inclure cette méthode dans les protocoles cliniques de traitement et de suivi des patientes atteintes d'un cancer du sein. L'originalité de notre approche, permet de capter les CTC par des méthodes d'immunosélection magnétique et en ensuite, d'une part les révélées par RT-PCR utilisant deux paires d'amorces CK-19 et MUC-1, et d'autre part déterminer par l'immunofluorescence semi-quantitative s'il existe parmi ces CTC une expression de BCL2 et P53, ceux-ci étaient compatible avec une résistance à l'apoptose de ces cellules. Les CTC résistantes à la apotosés sont potentiellement métastatiques. En revanche, si les CTC sont au contraire apoptotiques. Ces cellules sont potentiellement non métastatiques. La création d'un serveur informatique a fait partie de notre travail de thèse. Il permet à la fois de recueillir toute l'information clinique concernant les patients avec la possibilité de faire des études épidémiologiques. Cette information est mise en relation avec les résultats de recherche fondamentale. Nous avons souhaite, par notre démarche, améliorer le diagnostique de récidive tumorale, probablement pour permettre de mieux connaitre

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