Identification et caracterisation de nouvelles voies de signalisation associees aux recepteurs de la melatonine

Identification and characterization of new signalling pathways mediated by melatonin receptors

• Auteur / Autrice : Laurence Petit
• Direction : Arthur Donny Strosberg
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La melatonine, produite la nuit par la glande pineale, regule dans de nombreux organismes, l'activite rythmique de fonctions physiologiques comme la reproduction, la reponse immunitaire ou le sommeil. Les recepteurs de la melatonine appartiennent a la superfamille des recepteurs a sept domaines transmembranaires couples aux proteines g. L'activation de ces recepteurs conduit a une inhibition de l'adenylate cyclase par l'intermediaire d'une proteine gi. Nous avons exprimes dans des cellules eucaryotes les adnc codant pour trois recepteurs, mel1c de xenope, mel1a et mel1b humains. Le recepteur mel1c de xenope presente deux isoformes, mel1c() et mel1c(). Le recepteur mel1c() inhibe le niveau d'ampc alors que le recepteur mel1c() n'inhibe pas le niveau d'ampc. Les deux recepteurs inhibent l'accumulation de gmpc en presence d'un inhibiteur de phosphodiesterase (ibmx) de facon dose-dependante. Le recepteur mel1b inhibe egalement le niveau de gmpc tandis que le recepteur mel1a n'est pas couple a cette voie. La melatonine et un ligand synthetique, le s20098, presentent sur le recepteur mel1c un pouvoir agoniste fort pour les deux voies de signalisation. Par contre, le s20928 est un agoniste pour la voie gmpc et un antagoniste ou un agoniste partiel faible pour la voie ampc. Nous avons mis en evidence la presence de sites de liaison de haute affinite pour le radioligand sur une lignee d'adipocytes brun humains (paz6) et sur du tissu adipeux brun humain. Des experiences de pcr reverse ont revele l'expression des recepteurs mel1a et mel1b. Ces sites de liaison sont fonctionnels car ils inhibent le niveau d'ampc stimule par la forskoline dans les cellules paz6. La melatonine et le s20928 possedent un effet inhibiteur sur le niveau de gmpc. La modulation du niveau de gmpc est un effet specifique de mel 1b chez l'homme et permet d'envisager l'expression fonctionnelle de ce recepteur dans le tissu adipeux.